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《microrna-145对结肠癌细胞株sw480侵袭能力的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、microRNA-145对结肠癌细胞株SW480侵袭能力的影响王健张晓雨王明考朱晋国目的研究miR-145对结肠癌细胞株SW480侵袭能力以及对FSCN1表达的影响，探讨其在结肠癌侵袭转移中的机制。材料与方法木实验采用化学方法合成成熟的miR-145寡核苷酸模拟物(mimics)，以lipofectamine2000瞬时转染结肠癌细胞系SW480;转染后48小时，采用实时聚合酶反应(Real-timePCR)检测转染后各组miR-145的表达；转染后24小时，使用预铺基质胶的Tnnswell模型检测细胞侵袭能力；转染后72小时，通过蛋白免疫印记(Wes
2、ternBlot)检测FSCN1蛋白表达。结果与对照组比较，miR-145模拟物(miR-145mimics)组细胞miR-145表达明显升高(P<0.05)；穿过Transwell小室聚碳醋膜细胞数较对照组明显下降(P<0.05),蛋白印记(WesternBlot)显示FSCN1表达明显下降(P<0.05)o结论1、miFV145可降低结肠癌细胞株SW480的侵袭能力；FSCN1为miR-145的靶基因，miR-145可能通过对其负调控进而抑制肿瘤细胞侵袭，证明其可能在细胞侵袭过程中起到重要作用。【关键词】microRNA-145；
3、结肠癌；侵袭性；肿瘤转移EffectofmiR-145oninvasionabilityofColonicCancercelllineSW480.WangjianZhangxiao-yuWangming-kaoZhujin-guo【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofmiR-145oninvasionabilityofcolorectalcancercelllineSW480andregulationtoFSCN1,meanwhiletostudythemechanism.Material&Met
4、hodsColoniccancercelllineSW480wastransienttransfectedwithchemicallysynthesizedmaturemiR-145mimicoligonucleotidesbylipofecatamine2000.At48haftertransfection,theexpressionofmiRNA-145wasidentifiedbyReal-timepolymerasechainreaction(PCR).At24haftertransfection,thepre-coatedmatrigelmo
5、delwasusedfortheinvasionassay.At72haftertransfection,targetingproteinexpressionwasevaluatedbyWesternBlot,.ResultsAftertransfectionofmiR-145mimics,ascomparedwithcontrolgroup,themiR-145wasincreasedsignificantlyinmiR-145mimicsgroup,meanwhiletheproteinexpressionofFSCN1wasdown-regula
6、ted(P<0.05),andtheinvasionabilitywasdown-regulatedsignificantly(P<0.05).ConclusionOne:miR-145suppressinvasionabilityofcoloniccancercelllineSW480;Two:EvaluatedasatargetgeneofmiR-145,FSCN1isnegativeregulatedbymiR-145tosuppressinvasionabilityoftuomorcells,andmayplayanimportan
7、troleinmetastaticprocessoftumorcells.【Keywords】microRNA-145;Coloniccancer;Invasion;neoplasmmetastasis微小RNA(miRNA)是近年来新发现的一类内源性非编码小分子RNA,长约22nt,其序列在物种间具冇高度保守性。微小RNA通过与靶基因的3’非翻译区(3’UTR)上的靶序列结合抑制靶mRNA的翻译或者降解靶mRNA,发挥其基因沉默效应。微小RNA基因往往位于内含子中，转录后(原始miRNA)首先在细胞核内被加工成70nt左右的微
8、小RNA前体(pre-miRNA),转运到胞浆后再经Dicer酶切割成约22nt的成熟miRN
