pi3k抑制剂ly294002对结肠癌细胞sw480细胞株的影响及机制

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1、重庆医科大学硕士学位论文PI3K抑制剂LY294002对结肠癌细胞SW480细胞株的影响及机制姓名：马冬华申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：王亚是201205PI3K抑制剂LY294002对结肠癌细胞SW480细胞株的影响及机制摘要目的：探讨P13K—AKT信号通路对结肠癌细胞株(SW480)的增殖、凋亡及侵袭能力的影响，并探讨可能机制。方法：以不同浓度LY294002(59mol／L，101Lunol／L，20pmol／L，401mnol／L)分别作用于SW480细胞株，抑制P13K-AKT。然后用g／fiT法观察其对细胞活力的影响情况；用流式细胞仪(FlowCytomet

2、ry，FCM)检测阻断P13K—AKT信号通路后细胞凋亡率的变化；并通过Transwell小室侵袭实验来检测抑制该信号通路SW480细胞株的侵袭能力的变化；血管内皮生长因子(VEGF)、金属基质蛋白酶．9(M^口一9)的表达用免疫蛋白印迹(Westernblot)法检测。结果：LY294002使SW480细胞株的活性受到抑制，表现为活力下降，FCM分析得知其凋亡率增加；同时阻断P13K．AKT信号通路后，SW480细胞侵袭能力降低，VEGF、MMP．9表达减少。结论：P13K-AKT信号通路是结肠癌细胞株SW480增殖、抗凋亡、侵袭转移的重要因素，其机制可能与抑制VEGF、MMP．

3、9表达有关。对于结肠癌治疗方面，P13K-AKT信号通路是可能的潜在靶向目标分子。7关键词：黼，P13K-AKT，侵蝴1EfrectsandmechamsmsOfPBKInhibitorLY294002onColoncareinomacellsSW480ABSTRACTObjective：ToinvestigatetheeffectsofP13K-AKTsignalpathwayontheproliferation，apoptosisandinvasionofcoloncarcinomacells(SW480)，andtoexploreitspossibilitymechanism

4、．Methods：SW480cellslineswereculturedwitlldifferentconcentrationsofLY294002andobservetheresults，researchingtheeffectsofthevitalityofcellscausedbyP13K—AKTsignalpathwaybymeansofMTTassay；detectingtheapoptoticratebyFlowCytometry(FCM)；TranswellinvasiontestWasusedtoexaminetheinvasionabilityoftheSW480

5、cells；TheproteinlevelofVEGFandMMP一9weredetectedbyWesternblotingResnlts：LY294002inhibitsthegrowthofSW480celllines，induceapoptosis；inhibitiontheP13K-AKTsignalpathway，theinvasionofSW480cellsdegradesandtheexpressionofVEGFandMMP-·9reducesConclusion：P13K-AKTsignalpathwayplaysanimportantroleintheprol

6、iferation，apoptosisandinhibitionofcoloncarcinomacells(SW480)．ItsmechanismmayberelatedtoinlfibitingtheVEGFandMMP一9．P13K-AKTsignalpathwayprobablyisthepotentialtargetoftherapyin仃eatingmecoloncarcmoma．Keywords：Coloncarcinoma，P13K-AKTSignalPafllway，Invasion英文缩写CRCP13KAKTmTFCM英汉缩略语名词对照英文全称Coforectal

7、Carcinoma中文全称大肠癌(结直肠癌)phosphoinositide3一kinase磷脂酰肌醇3激酶ProteinKinaseB3．(4．5一Dimethylthiazol一2一y1)一2，5一diphenyltetrazoliumbromideflowcytometryWesternblotWestemblotDⅣ【sOPTENActinmRNAs氓NAFUPBSFBSVEGFⅦGFR～蝴ECMdimethylsulfoxidephosphataseandt