去甲肾上腺素对胰腺癌细胞株miapaca2侵袭能力的影响

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1、去甲肾上腺素对胰腺癌细胞株MiaPaCa2侵袭能力的影响作者：郭坤，沙焕臣，马清涌，王连才，胡恒通【摘要】目的探讨经典神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对人胰腺癌细胞株MiaPaCa2侵袭能力的影响及其作用机制。方法取人胰腺癌细胞株MiaPaCa2为研究对象，实验分为空白对照组、0.1μmol/LNE干预组、1μmol/LNE干预组和10μmol/LNE干预组。干预48h后，采用Transwell侵袭实验检测各组中MiaPaCa2细胞侵袭能力的变化;RTPCR法检测细胞中MMP

2、2、MMP9和VEGFmRNA的表达;免疫细胞化学法检测细胞中MMP2、MMP9和VEGF蛋白的表达。结果1μmol/LNE干预组和10μmol/LNE干预组MiaPaCa2细胞的侵袭能力均高于空白对照组(P<0.01);1μmol/LNE干预组和10μmol/LNE干预组MiaPaCa2细胞中MMP2、MMP9和VEGFmRNA和蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05)。结论NE可以通过上调MMP2、MMP9和VEGF的表达从而促进胰腺癌细胞发生远处侵袭转移。【关键词】胰腺

3、癌;细胞侵袭;神经递质;去甲肾上腺素　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectofnorepinephrine(NE)ontheinvasivenessofpancreaticcancer10celllineMiaPaCa2anditsactionmechanism.MethodsThepancreaticcancercelllineMiaPaCa2wasusedintheresearch.Thecellswererandomlydividedintocontrol

4、group,0.1μmol/LNEinterventiongroup,1μmol/LNEinterventiongroupand10μmol/LNEinterventiongroup.Afterinterventionfor48h,TranswellinvasivenesstestwasgiventoexaminethechangesofinvasiveabilityofMiaPaCa2.TheexpressionsofMMP2mRNA,MMP9mRNAandVEGFmRNAweremeasuredbys

5、emiquantitativeRTPCR;thelevelsofMMP2,MMP9andVEGFproteinsweremeasuredbyimmunocytochemicalmethod.ResultsTheinvasiveabilityofMiaPaCa2in1μmol/LNEinterventiongroupand10μmol/LNEinterventiongroupwassignificantlyhigherthanthatincontrolgroup(P<0.01).Thelevels

6、ofMMP2,MMP9andVEGFmRNAandproteinexpressionofMiaPaCa2in1μmol/LNEinterventiongroupand10μmol/LNEinterventiongroupwerehigherthanthoseincontrolgroup(P<0.05).ConclusionNEcanpromotetheinvasivenessofMiaPaCa2throughupregulatingtheexpressionsofMMP2,MMP9andVEG

7、F.　　KEYWORDS:pancreaticcancer;cellinvasiveness;neurotransmitter;norepinephrine10　胰腺癌具有侵袭力强、早期即发生转移的特点，5年生存率不足5%，其主要原因是患者在就诊时肿瘤就已经发生了远处转移。肿瘤细胞侵袭能力增强是肿瘤远处转移的先决条件。所以，研究胰腺癌细胞侵袭能力的影响因素对指导临床诊治有重要意义。近年来，肿瘤细胞微环境中的信号物质对肿瘤细胞侵袭能力的影响成为研究的热点，这些信号物质包括趋化因子和神经递质两类[1]。本研究旨在通

8、过观察胰腺癌细胞株MiaPaCa2在不同浓度经典神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的干预下侵袭能力的变化，以及细胞中MMP2、MMP9、VEGFmRNA和蛋白表达的变化，探讨NE对胰腺癌细胞侵袭能力的影响及其作用机制。　　1材料与方法　　1.1材料胰腺癌细胞株MiaPaCa2由西安交通大学医学院中心实验室提供;高糖DMEM培养基及小牛血清购自Gibco公