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生化试验——氨基酸和蛋白质代谢试验
1一、微生物的生化反应概念：用生化的方法来检测细菌对各种基质的代谢作用及代谢产物，借以鉴别细菌种类，这种生化试验称为细菌的生化反应试验。意义：是鉴别细菌的重要依据。
2生化反应碳水化合物代谢试验各种酶类试验抑菌试验糖发酵试验甲基红试验V-P试验蛋白质和氨基酸代谢试验产硫化氢试验..........靛基质试验碳源和氮源利用试验枸橼酸盐利用试验IMViC试验
3氨基酸和蛋白质代谢试验一：靛基质试验二：产H2S试验三：尿霉素试验四：苯丙氨酸脱氨酶试验五：明胶液化试验
4一、靛基质试验——实验原理色氨酸色氨酸酶靛基质（吲哚）对二甲基氨基苯甲醛玫瑰靛基质（玫瑰吲哚）
5一、靛基质试验——实验原理色氨酸的分解反应：吲哚反应：
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8一、靛基质试验——实验结果Thisimagedepictstheresultsofnegativeandpositiveindoletests.TheindoletestisfrequentlyemployedtodistinguishKlebsiella（克雷伯菌属）orEnterobacter（肠杆菌属）bacteria(indolenegative)fromEscherichiacoli(indolepositive).ThepresenceofE.coliisusedbypublichealthofficialsasanindicatoroffecalcontaminationoffoodandwatersupplies.
9一、靛基质试验——应用检测嗜肺巴氏杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、志贺氏痢疾杆菌等。变形杆菌
10二、产硫化氢试验——实验原理某些菌能分解含硫的有机物或无机物产生硫化氢（H2S），H2S遇金属盐类，如铅盐、铁盐等，则形成黑色的硫化铅或硫化铁的沉淀物。从而可断定H2S的产生与否。
11二、产硫化氢试验——实验方法方法一：用含有柠檬酸铁铵的培养基穿刺培养，看是否有黑色沉淀。方法二：在盛有液体培养基的试管中接种菌以后，在试管的棉塞下吊一片醋酸铅试纸，经培养后看醋酸铅试纸是否变黑。
12二、产硫化氢试验——结果及应用[结果]：沿穿刺线部位呈黑褐色，表明有硫化氢产生，为阳性以“+”表示，不变色者为阴性，以“-”表示。大肠杆菌：-变形杆菌：+[应用]：主要用于肠道杆菌的检验H2S试验
13三、尿霉素试验原理尿素尿素酶氨+CO2培养基pH升高酚红呈碱性变红色
14三、尿霉素试验[原理]某些细菌能产生尿霉素，将尿素分解产生氨，氨使培养基变为碱性，使培养基中的酚红指示剂呈粉红色，培养基由黄色变为红色，为阳性。以此鉴别细菌[方法]挑取大量培养18-24h的待试菌→浓密涂布接种于尿素琼脂斜面上（不要到达底部，留底部作变色对照）→培养2、4和24小时分别观察1次，培养基变为粉红色为阳性，颜色不变者为阴性。→如阴性应继续培养至4天，作最终判定。
15三、尿霉素试验结果培养基变呈粉红色，为阳性，记+培养基颜色不变，为阴性，记-
16四、氨基酸脱羧酶试验——原理赖氨酸/鸟氨酸氨基酸脱氨酶氨+CO2紫色为阳性
17四、氨基酸脱羧酶试验某些细菌能产生氨基酸脱羧酶,可使赖氨酸、鸟氨酸生产脱羧作用,生成胺类物质和CO2。胺类物质使培养基呈碱性变紫色，为阳性,如呈黄色为阴性，以此鉴别细菌。对照管呈黄色，说明有细菌生长。在培养的早期（10~12h），细菌发酵葡萄糖产酸使培养液PH下降，指示剂溴甲酚紫由紫色变为黄色，以后由于氨基酸脱羧生成胺，PH又回升至碱性，指示剂显紫色。取待检菌→分别接种于含有氨基酸的培养基内和不含氨基酸的对照培养基内→在36±1℃培养1~4天，每天观察结果。[方法][原理]
18四、氨基酸脱羧酶试验
19四、氨基酸脱羧酶试验结果试验管呈紫色，对照管呈黄色，为阳性，记+试验管、对照管都呈黄色，为阴性，记-。阳性反应试验管颜色变化过程：紫色→黄色→紫色
20四、氨基酸脱羧酶试验应用主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。如沙门菌属中除伤寒和鸡沙门菌外，其余沙门菌的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶均为阳性。志贺菌属除宋内和鲍氏志贺菌外，其他志贺菌均为阴性。沙门氏菌鲍氏志贺菌
21五、苯丙氨酸脱氨酶试验——原理苯丙氨酸苯丙氨酸脱氨酶苯丙酮酸10％三氯化铁绿色化合物
22五、苯丙氨酸脱氨酶试验[原理][方法]从待检菌琼脂斜面上挑取大量培养物→接种于苯丙氨酸培养基上→在36±1℃培养18~24h后→加入氯化铁溶液4~5滴→转动试管（使试剂与菌苔表面充分接触）→立即观察结果。某些细菌可产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基，形成苯丙酮酸，苯丙酮酸与氯化铁作用生成绿色化合物，以此鉴别细菌。
23五、苯丙氨酸脱氨酶试验——结果试验管立即出现绿色，为阳性，记+无色为阴性，记-。
24五、苯丙氨酸脱氨酶试验——应用主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属细菌均为阳性，肠杆菌种中其他细菌均为阴性。
25六、明胶液化试验——原理明胶明胶酶多肽明胶酶氨基酸培养基变为液态
26六、明胶液化试验——原理有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步将多肽水解为氨基酸，明胶失去凝胶性质，使培养基由固态变为液态。
27六、明胶液化试验——方法挑取培养18~24h的待试菌→穿刺接种于明胶高层约2/3深度→于20~22℃培养7~14天→明胶高层亦可培养于36±1℃→另取一支未接种的培养基一同培养作对照→每天取出两支试管→放入冰箱放置20~30min后→再观察结果。
28六、明胶液化试验——结果明胶液化，为阳性，+。明胶凝固，为阴性，-。
29六、明胶液化试验——应用肠杆菌科细菌的鉴别，如沙雷菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌、阴沟杆菌等可液化明胶，而其他细菌很少液化明胶。有些厌氧菌如产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌等也能液化明胶。另外多数假单胞菌也能液化明胶。阴沟杆菌沙雷菌
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