菌种的制备和保藏-1.ppt

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1、第五章菌种的制备和保藏授课教师贺立虎1第一节微生物的生长繁殖2生长——微生物细胞吸收营养物质,进行新陈代谢,当同化作用>异化作用时,生命个体的重量和体积不断增大的过程。繁殖——生命个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。发育——从生长到繁殖,是生物的构造和机能从简单到复杂、从量变到质变的发展变化过程,这一过程称为发育。个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质,进行新陈代谢,原生质与细胞组分的增加为个体生长。群体生长——群体中个体数目的增加。可以用重量、体积、密度或浓度来衡量。(由于微生物的个

2、体极小,所以常用群体生长来反映个体生长的状况)个体生长个体繁殖群体生长群体生长=个体生长+个体繁殖一、生长与繁殖的概念3二、细菌的繁殖一般为无性繁殖,二分裂法。同形裂殖:裂殖后形成的子细胞大小相等。异形裂殖:分裂产生两个大小不等的子细胞。细菌分裂过程:①菌体伸长,核质体分裂②形成横隔壁③子细胞分离无性繁殖有性繁殖☆少数有菌毛的菌可进行有性繁殖方式4三、放线菌的生长繁殖5★由分枝状菌丝组成。菌丝无隔膜,仍属单细胞。菌丝直径与杆菌相似(1m左右);细胞壁含磷壁酸、二氨基庚二酸,不含几丁质、纤维素;革兰氏阴性。1、放线菌的形态构造★菌

3、丝根据形态和功能不同可分为:基内菌丝(Substratemycelium)气生菌丝(Aerialmycelium)孢子丝(Reproductivemycelium)62、放线菌的繁殖方式7四 霉菌的繁殖方式8):1.孢囊孢子(sporangiospore)形成特征:形成于菌丝的特化结构——孢子囊内。孢子形态:近圆形。举例:根霉、毛霉。92.分生孢子(Canidinm):形成特征:由分生孢子梗顶端细胞特化而成的单个或簇生的孢子。孢子形态:极多样。举例:曲霉、青霉。103.节孢子(arthrospore,又称粉孢子)形成特征:由菌丝断裂而

4、成。孢子形态:常呈成串短柱状。举例:白地霉。11厚垣孢子4.厚垣孢子(Chlamydospore)形成特征:部分菌丝细胞质浓缩、变圆,周围生出厚壁而成。孢子形态:圆形、柱形等。举例:总状毛霉。12有性结构及其形态特征:由大小不同的配子囊结合后发育而成。小配子囊称雄器;大配子囊称藏卵器。所属分类地位:卵菌纲。1.卵孢子(oospore)132.接合孢子(zygospore):有性结构及其形态特征:是由菌丝生出的结构大小相似、形态相同或略有不同两个配子囊接合后发育而成。所属分类地位:接合菌纲接合孢子形成过程:143.子囊孢子(ascosp

5、ore):有性结构及其形态特征:在子囊中形成。子囊:两性细胞接触以后形成的囊状结构。子囊的形成有两种方式:①两个营养细胞直接交配而成,其外面无菌丝包裹;②从一个特殊的、来自产囊体菌丝(称为产囊丝)的结构上产生子囊,多个子囊外面被菌丝包围形成子实体,称为子囊果。所属分类地位:子囊菌纲154.担孢子(basidiospore)有性结构及其形态特征:担子菌所特有,经两性细胞核配合后产生的外生孢子。因着生在担子上而得名。所属分类地位:担子菌纲16五、微生物生长的测定方法描述不同种类、不同生长状态的微生物生长情况,需选用不同的测定指标。(一)微

6、生物细胞数目的检测法直接法(血球计数板、比例计数法)间接法(活菌计数法、液体稀释法、膜过滤法)(二)微生物生长量和生理指标测定法直接法(干重法,堆体积法)间接法(比浊法,碳、氮含量法,其它生理指标)171.涂片染色法应用:可同时计数不同微生物的菌数,适 于土壤、牛奶中细菌计数。方法:用镜台测微尺计算出视野面积;取 0.01ml菌液涂于1cm2面积上,计数后代 入公式:每ml原菌液含菌数=视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100×稀释倍数18原理:将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400小格,从中均匀分布地选取80或100小格,计

7、数其中的细胞数目,换算成单位体积中的细胞数。适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞,因为(1)细菌细胞太小,不易沉降;(2)在油镜下看不清网格线,超出油镜工作距离。特点:快速,准确,对酵母菌可同时测定出芽率,或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。2.血球计数板法192.血球计数板法203.比浊法原理是在一定范围内,菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌数越多,光密度越大。因此,借助于分光光度计,在一定波长下测定菌悬液的光密度,就可反应出菌液的浓度。特点:快速、简便;但易受干扰。

8、214.平板菌落计数法★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速(15~20min完成操作),严格无菌操作;★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释度,样品混匀处理,倾注平板时的培养基温度;★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能

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