课题1 微生物的实验室培养ppt课件.ppt

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1、专题2:微生物的培养与应用巴斯德的曲颈瓶实验说明了什么1862年，巴斯德设计出一个巧妙的曲颈瓶试验。他给烧瓶安装了一像横着眼放的S形状的长颈，当把烧瓶中的肉汤煮沸时，不仅瓶中的微生物被杀死了，水蒸汽把瓶颈中的微生物也杀死了。等到汤放凉时，新鲜的空气就可以通过瓶颈自由进到瓶子中，而带菌的灰尘由于比空气重，在长颈向下弯曲处就被拦截住了。经过这样处理的培养液放许多天也不会变质。而如果把培养液倾斜，让它通过长颈的弯曲部，或者把长颈打断，培养液中很快就会充满了微生物。这样就令人信服地证明了，是空气中的微生物使汤腐败的，而

2、不是汤腐败产生微生物。微生物包括哪五类：病毒细菌放线菌等真菌原生生物特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.原核生物真核生物中的单细胞生物病毒微生物基础知识培养基的营养构成一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。标准培养基类型配制特点

3、主要应用物理性质固体培养基半固体培养基液体培养基化学组成合成培养基天然培养基目的用途鉴别培养基选择培养基（一）培养基标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基菌种分离,鉴定,计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生产降低成本目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加（或缺少）某种化学成分菌种的分离（一）培养基加入琼脂较多固体培养基：

4、菌落液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基：无动力有动力(弥散)(是否运动)选择培养基加入青霉素的培养基（抑制细菌，放线菌）:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基（抑制多种细菌）:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物大肠杆菌菌落呈深紫色,有金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝培养基上典型特征鉴定培养基：鉴定所培养生物的类型碳源、氮源、生长因子的比较来源常用原料功能碳源CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等糖类构成细胞物质和一些代

5、谢产物，有些还是异养做生物的主要能源物质氮源N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏和蛋白胨等铵盐、硝酸盐等合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物特殊营养物质（生长因子）维生素、氨基酸、碱基酶、核酸等的组成成分培养基配制原则：根据微生物生长对PH，特殊营养物质以及氧气的需求来配制细菌pH为：中性或微碱性霉菌pH为：酸性；乳酸杆菌培养需添加维生素。（二）无菌技术1.无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法----------成功地培养纯净微生物的关键。无菌技术包括：　（1）对实验操作空

6、间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；　（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；　（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；　（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。从哪些方面避免杂菌污染呢？（１）消毒定义：指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）2.消毒与灭菌的概念及两者的区别使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达到完全无菌之过程。灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。

7、（2）灭菌的定义：比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能消毒与灭菌的比较1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：不耐高温的液体如牛奶70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化学药剂消毒法:用75%酒精(擦拭双手）、新洁尔灭等（进行皮肤消毒）;氯气消毒（水源）喷洒石碳酸或煤酚皂4、紫外线照射消毒杀死表面或空气中微生物-如接种室使用前……(1)消毒的方法：3.常用的消毒与灭菌的方法1、灼烧灭菌（火焰灼烧）接种环

8、、接种针、试管口2、干热灭菌：耐高温需要保持干燥的物品如玻璃器皿和金属用具160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.(2)灭菌的方法：最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，