课题1 微生物的实验室培养课件.ppt

《课题1 微生物的实验室培养课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、微生物的实验室培养一、基础知识（一）培养基1、概念：2、种类据物理性质，培养基的种类包括和。琼脂：琼脂是一种从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。98℃以上融化，44℃一下凝固。人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。【补充】培养基的类型及其应用：3、培养基的成分（1）主要营养物质：一般都含有。（2）还需要满足微生物生长对、特殊营养物质（生长因子）以及的要求生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。（二）无菌技术获得纯净培养物的关键是。1、无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的

2、衣着和手，进行清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。防止外来杂菌的入侵无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染。2、消毒和灭菌芽孢≠孢子二、实验操作（大肠杆菌的纯化培养）（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、计算确定培养基用量，依配方计算各成分的用量。2、称量牛肉膏黏稠，玻璃棒挑取，放在称量纸上称量；牛肉膏和蛋白胨易吸潮，动作迅速、称后盖上瓶盖。3、溶化牛肉膏、称量纸、少量水加热溶解→取纸→蛋白胨、

3、NaCl→琼脂→补水定容(调节PH)不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底导致烧杯破裂。4、灭菌配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞,包上牛皮纸),培养皿5~8套一包包旧报纸5、倒平板培养基冷却至50℃，在酒精灯火焰附近进行【倒平板操作】①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。倒平板操作注意事项：①培养基要冷却到50℃左右时开始倒平板。②要使锥形瓶的瓶口通过火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。③平板冷凝后，要将平板倒置。平板倒置后

4、，既可防止培养基的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。④在倒平板的过程中，不能使培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。⑤整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。配置培养基是否合格培养基配制好后，要放在恒温箱中保温1～2d，若无菌落生长则说明制备的培养基是合格的。（二）纯化大肠杆菌微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。【平板划线操作】【平板划线操作】几次灼烧接种环的目

5、的【涂布平板操作】（三）菌种的保存