课题1微生物的实验室培养课件.ppt

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1、常见的三种细菌典型形态A.球菌B.杆菌C.弧菌课题1微生物的实验室培养（一）培养基：1、培养基概念按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。营养物质生长繁殖2、培养基种类包括培养基和培养基等。3、培养基的化学成分一般都含有、、和四类营养成分。还需要满足微生物生长对、及等的要求。固体液体水碳源氮源无机盐pH特殊营养物质氧气标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多微生物的分离、计数等半固体培养基加入琼脂较少观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成

2、合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生产目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物选择培养基添加（或缺少）某种化学物质培养、分离出特定的微生物选择培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞可抑制细菌、放线菌细胞壁主要成分肽聚糖的合

3、成其细胞壁是由纤维素、几丁质、葡聚糖组成菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。（二）无菌技术1、无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下四个方面（1）对实验操作的、操作者的，进行清洁和；（2）将用于微生物培养的器皿、和等进行；（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行；（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。空间衣着和手消毒接种用具培养基灭菌酒精灯火焰2、消毒和灭菌（1）消毒

4、：消毒是指使用方法仅杀死物体表面或内部一部分的微生物，(包括；不包括)芽孢和孢子，常用的方法有消毒法、消毒法、消毒法。（2）灭菌：灭菌是指使用杀死物体内外，(包括，不包括)芽孢和孢子，常用的方法有灭菌、＿＿＿灭菌和灭菌。较为温和的物理或化学对人体有害不包括煮沸巴氏化学药剂强烈的理化因素所有的微生物包括灼烧干热高压蒸汽[思维激活]用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌？70%与95%的酒精，哪一种效果更好？为什么？提示酒精擦拭属化学消毒，酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固

5、成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌消毒的方法：1、煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min2、巴氏消毒法：70～75℃下煮30min或80℃下煮15min3、用体积分数为50%～70%酒精溶液等进行皮肤消毒4、氯气消毒水源5、紫外

6、线消毒灭菌的方法：1、灼烧灭菌2、干热灭菌：160～170℃下加热1～2h3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15～30min3.常用的消毒与灭菌的方法：是指用紫外线（能量）照射杀灭微生物的方法，紫外线不仅能使核酸、蛋白质变性，而且能使空气中氧气产生微量臭氧，从而达到共同杀菌作用。1、灼烧灭菌：灭菌的方法：2、干热灭菌：160～170℃下加热1～2h。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃条件下维持15～30min。答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要灭菌；（3

7、）需要消毒。1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手思考：三、实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）1.计算2.称量3.溶化4.灭菌5.倒平板操作步骤：配方：1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成培养基组分提供的主要营养牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10g碳源、氮源和维生素NaCl5g无机盐

8、H2O定容至1000mL氢元素、氧元素倒平板技术1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。讨论：3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的