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1、陈金龙1、荧光基本原理荧光是发光体分子中原子的核外电子由高能级回跳到低能级所产生的辐射。某些物质吸收了与它本身的特征频率相同的光量子后，其原子中的电子被激发到较高的能级，从而产生吸收光谱。有些物质，当用紫外光线照射时，它吸收了某种波长的光后还会发射出各种颜色和不同强度的光；而当紫外线停止照射后，这种光也随之消失，这种光称为荧光。荧光是跃迁到激发态的电子直接从单重激发态以辐射方式跃迁到基态所发射的光。荧光的波长比吸收的紫外线的波长要长些。由于物质的分子结构不同，所吸收的紫外线和所发射的荧光的波长也不同。被这些物质吸收的紫外线称为激发光，产生的发射光即荧光。物质的荧光有两种
2、：自发性荧光和诱发荧光。后者常用，能产生荧光的生物染色剂称为荧光染料或荧光探针，组织或细胞的荧光染色只有在配备了适当光源的荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜下才能显示和观察。2、常见染料种类荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光分子探针主要包括荧光基团、连接基团和识别基团。荧光基团是发出光学信号的信息源,识别基团是可以与待检测物特异性结合的基团,而连接基团是连接荧光基团和识别基团的部分。常规的荧光染料：1）小分子。香豆素；酞菁染料；异硫氰酸酯类（异硫氰酸酯荧光素FITC,罗丹明RhB,R
3、h6G）；罗丹明（RhB,Rh6G）；青色素染料。2）稀土金属复合物：Tb（绿），Eu（红）3）量子点：半导体纳米晶体（ZnS@CDSeQDs）4）金属纳米簇：Au，Ag，Pt，Cu。5）碳纳米材料：石墨烯，石墨烯量子点(GQDs)，C60，单壁碳米管（SWNTs）非常规荧光染料：多光子和上转换；聚集诱导发光效应（AIE）3、分析化学药物分子相关期刊名目TrendsinPharmacologicalSciences 、NatureReviewsMolecularCellBiology、JourneyofAmericanChemicalSociety、ChemicalCo
4、mmunications、Organicletters、MolecularPharmacology、medicinalresearchreviews、Biological&PharmaceuticalBulletin、TetrahedronLetters、Talanta、DrugMetabolismandDisposition、AnalyticalChemistry,TheAnalyst，JournalChromatographyA，JournalChromatographyB(荷兰)，ABC(AnalyticalandBioanalyticalChemistry),E
5、lectrophoresis,science,nature,CNKI,AnalyticaChimicaActa,JournalofSeparationScience,JournalofPharmaceuticalandBiomedicalAnalysis,AnalyticalSciences,Chromatographia,AnalyticalLetter,JournalofChromatographicScience,ChineseJournalofanalyticalchemistry国内：药学学报、药物分析杂志、中国药学杂志等丁黎1、生物样本种类，特点，及前处理方
6、法1）血液。分为血浆/血清或全血。测定血浆或血清中的药物浓度能较好的反映体内药物浓度变化。若专门测定平均分布于血细胞内外的药物浓度，则用全血。血浆采集应加入抗凝剂。离心，取上清液，血清静置，移走血饼，离心，取上清液。处理方法有沉淀蛋白法、液液萃取法、固相萃取法。2）尿样，用于药物剂量回收研究、药物尿清除率、生物利用度研究。易收集，但易受生理情况影响。方法：酸解或酶解可使药物从缀合物中游离出来。3）唾液：易收集，采集后应立即出去泡沫部分的体积，放置后易分层，离心，取上清液。4）组织：为药物的吸收、分布、代谢、排泄等体内过程提供重要信息。组织处理方法：匀浆化法，蛋白沉淀法，
7、酸碱水解，酶水解5）头发：取样方便，无伤害，检样的掺伪可能性低，可测微量元素。头发采集后需洗涤，处理方法有提取法，有机破坏法。6）其他：乳汁，精液。2、生物样品前处理方法及特点1）有机破坏法：包括湿法破坏、干法破坏和氧瓶燃烧法，适合人发样品的破坏破坏能力强，反应激烈。2）直接沉淀法：将一定量生物样品加蛋白沉淀剂，涡旋，离心，取上清液进样。当样品中待测物浓度较高，所用方法的特异性和灵敏度达到检测要求时可以考虑用直接沉淀法。注意沉淀剂体积、沉淀剂的选择及对药物稳定性的影响（氧化、酸不稳定）。可使接合型药物释放出来，缺点容易乳化。3）液液萃取法
