细胞培养分析课件

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1、细胞培养基本知识合适的环境和必需的条件营养需要环境要求无毒及无污染环境要求根据《中华人民共和国传染病防治法实施办法》规定：凡从事致病性微生物实验的科研、教学和生产单位，作为各类传染病菌（毒）研究操作的基本单元，实验室必须有防止致病性微生物扩散的制度和人体防护措施。不同危害群的微生物必须在不同的物理性防护的条件下进行操作，一方面防止实验人员和其他物品受到污染，同时也防止其释放到环境中。传染病原危害等级。第一级危害群微生物：与人类成人健康和疾病无关；（无或极低的个体和群体危险）不太可能引起人或动物致病的微生物第二级危害群微生物：在人类所引起的疾病很少是严重的，而且通常有预防及治疗的方法

2、；（个体危险中等，群体危险低）实验室暴露也许会引起严重感染，但对感染有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。第三级危害群微生物：在人类可以引起严重或致死的疾病，可能有预防和治疗方法；第四级危害群微生物：在人类可以引起严重或致死的疾病，通常无预防和治疗的方法，如炭疽杆菌、霍乱弧菌、埃博拉病毒、天花病毒等。由隔离的设备、实验室的设计及实验实施等3个方面所组成.根据其密封程度的不同，分为P1、P2、P3和P4四个生物安全等级。P是英文protect（保护）的缩写。生物安全实验室实验室可分：基础实验室——一级生物安全水平、基础实验室——二级生物安全水平、防护实验室——三级生物安全水

3、平最高防护实验室——四级生物安全水平。四级生物安全（P4）是生物安全实验室等级最高的实验室，可以有效阻止传染性病原释放到环境中，同时给研究人员提供生物安全的保证。1级基础实验室——一级生物安全水平基础的教学、研究,GMT不需要；开放实验台2级 基础实验室——二级生物安全水平初级卫生服务；诊断、研究；GMT加防护服、生物危害标志开放实验台，此外需BSC用于防护可能生成的气溶胶BSC：生物安全柜；GMT：微生物学操作技术规范典型的二级生物安全水平实验室门保持关闭并贴上适当的危险标志。潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。基本生物安全设备1.移液辅助器—避免用口吸的方式移液2.生物安全柜，

4、在以下情况使用：—处理感染性物质；如果使用密封的安全离心杯，并在生物安全柜内装样、取样，则这类材料可在开放实验室离心—进行极有可能产生气溶胶的操作时（离心、研磨、混匀、剧烈摇动、超声破碎、打开内部压力和周围环境压力不同的盛放有感染性物质的容器、动物鼻腔接种以及从动物或卵胚采集感染性组织）。3.一次性塑料接种环；也可在生物安全柜内使用电加热接种环，以减少生成气溶胶。4.螺口盖试管及瓶子。5.用于清除感染性材料污染的高压灭菌器或其他适当工具。6.一次性巴斯德塑料移液管，尽量避免使用玻璃制品。7.在投入使用前，像高压灭菌器和生物安全柜等设备必须用正确方法进行验收。应参照生产商的说明书定期

5、检测。3级 防护实验室——三级生物安全水平特殊的诊断、研究，在二级生物安全防护水平上增加特殊防护服、进入制度、定向气流BSC和／或其他所有实验室工作所需要的基本设备4级 最高防护实验室——四级生物安全水平危险病原体研究.在三级生物安全防护水平上增加气锁入口、出口淋浴、污染物品的特殊处理,Ⅲ级BSC或Ⅱ级BSC。穿着正压服、双开门高压灭菌器（穿过墙体）、经过滤的空气。每个实验室都应该采用“安全手册”或“操作手册”，其中定义了已知的和潜在的危害，并规定了特殊的操作程序来避免或尽量减小这种危害。规范的微生物学操作技术是实验室安全的基础，而专门的实验设备仅仅是一种补充，绝不能替代正确的操作

6、规范。实验室生物安全水平与各危险度等级微生物相对应在一级生物安全水平操作的微生物不太可能引起人类疾病或兽医学意义的动物疾病。但理想的做法是，所有实验室工作人员应进行上岗前的体检，并记录其病史。疾病和实验室意外事故应迅速报告。在二级生物安全水平操作微生物的实验室工作人员1.必须有录用前或上岗前的体检。记录个人病史，并进行一次有目的的职业健康评估。2.实验室管理人员要保存工作人员的疾病和缺勤记录。3.育龄期妇女应知道某些微生物（如风疹病毒）的职业暴露对未出生孩子的危害。根据《中华人民共和国传染病防治法实施办法》规定：凡从事致病性微生物实验的科研、教学和生产单位，作为各类传染病菌（毒）研

7、究操作的基本单元，实验室必须有防止致病性微生物扩散的制度和人体防护措施。我国在生物安全方面也制定过一些相应的条例和法规。中华人民共和国卫生行业标准（WS233－2002）《微生物生物医学实验室生物安全通用准则》中对生物安全三级（P3）实验室进行了规定。无毒无污染无毒：无毒是培养细胞的必需条件。凡与细胞直接或间接接触的东西都必须是无毒的。无污染微生物的污染不同细胞类型的交叉污染细菌霉菌支原体等无菌操作中的注意事项在无菌操作中，一定要保持工作区的无菌清洁操作前,无菌室及无