体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法-论文.pdf

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1、中国组织工程研究第78卷29崩2014—07—09出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchJuly9．2014VoL18,No．29www．CRTER．org体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法尹寿新’，周震，马美雪。，杨景波’，羊东晔’(’中南大学湘雅二医院消化内科，湖南省长沙市410011；长沙市第一医院消化内科，湖南省长沙市410005；：州市中心医院；肖化内科，江苏省徐州市221009)文章亮点：．1肝卵圆细胞是目前公认的成体肝干／祖细胞，肝干细胞移植／肝再生和肝卵圆细胞恶性转变等研究广受关注。但尹寿新，男，1989

2、年生，其体外长期培养时会不可避免地丢失干细胞的活性，因此探索肝卵圆细胞体外长期培养方法具有重要的实际意义。山东省济南市人，汉族，2014年中南大学湘雅医2实验使用仅含表皮细胞生长因子、白血病抑制因子的培养基体外培养原代卵圆细胞，4个月时证明其仍能学院毕业，硕士，医师，保持双向分化的能力，培养时间较长，且其操作简单、成本相对较小，此前未见有类似报道，可为其他研究主要从事肝癌和肝再生的者体外培养肝卵圆细胞提供一种新的选择。研究3此前有多种文献认为卵圆细胞表达Thy．1，但本实验中无论是2一乙酰胺基芴，部分肝切除模型再生肝组织切片、卵圆细胞免疫细胞染色还是卵圆细胞蛋白We

3、sternblot都未发现Thy-1表达，这与某些造血干细胞极少并列第一作者：周震，男，1985年生，湖南省邵阳市转化为肝干，祖细胞或肝细胞的报道一致。人，琢族，2013年中南大关键词：学湘雅医学院毕业，硕士，组织构建：组织I程：郛圆细魄：长期培养：表安生长因子；白遗病抑镪函子：国家自然科学基金医师，主要从事肝癌和肝主题词：再生的研究。盱细跑：表皮生长因子：白盘病抑瓴因子：细跑．培养的通讯作者：羊东晔，博士基金资助：后，副主任医师，中南大2810年国家自然科学基金【8∞281学湘雅二医院消化内科，湖南省长沙市410011摘要背景：肝卵圆细胞是目前公认的成体肝干，祖细

4、胞，但其体外长期培养时会不可避免地丢失干细胞的活性。doi：10396剐．issd．2095-4344201429．O13目的：探索大鼠肝卵圆细胞体外长期培养的方法。【http：／／www．crter．org】方法：构建2一乙酰胺基芴，部分肝切除肝再生大鼠模型，通过酶消化和Percoll梯度离心分离纯化大鼠异质卵圆细胞并进行免疫染色鉴定，用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外长期培养，后撤去表皮生长中图分类号：R318因子、白血病抑制因子，通过形态学的观察和分子标志物的检测判断其能否保持干，祖细胞活性。文献标识码：B结果与结论：采用含表皮生长因子、白血病抑制因

5、子的培养基体外培养卵圆细胞4个月后，大鼠异质卵圆细文章编号：2095-4344f2014)29-04663．06胞仍能表达肝细胞标志物ALB、胆管上皮细胞标志物CK．19，经不含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养稿件接受：2014-05-27液继续培养后，卵圆细胞胎肝标志AFP表达量迅速下降。该研究结果表明大鼠肝卵圆细胞在表皮生长因子、白血病抑制因子等培养条件下可长期增殖并保持干细胞活性。尹寿颞．两震．马美雪．杨景波．羊东晔．钵钋大鼠歼郛函缅魄的长期培养方懑趣．中国组织I程磅究。2014．78f29J：4663—4668．ⅥnShou·xin。MastePhysic

6、ian，DepartmentofGastroenterology＆Hep=ology,Long-termcultureofhepaticovalcellsinrats／nv／trotheSecondXiangyaHospitalofCentraISouthUniversity,Changsha410011．Hunen'finShou．xin’，ZhouZhen，MaMei-xue。，YangJing．bo!，YangDong-ye’(’DepartmentofGastroenterologyProvince，China&Hepatology,theSecondXia

7、ngyaHospitalofCentralSouthUniversity,Changsha410011。HunanProvince。China；DepartmentofGastroenterology&Hepatology,theFlrstChangshaHospital，ChangshaZhouZhen，Master,Physician．410005，HunanProvince，China；。DepartmentofGastroenterology&Hepatology,XuzhouCentralHospital，DepartmentofXuzhou22100