体外诱导大鼠肝卵圆细胞定向分化为胆管上皮细胞-论文.pdf

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1、第24卷第16期中国现代医学杂志VoL24No．162014年6月ChinaJournalofModemMedicineJun．2014文章编号：1005—8982(2014)16—0010—05·论著·体外诱导大鼠肝卵圆细胞定向分化为胆管上皮细胞术陈奕明，李立，冉江华，张升宁，张蕾，苏晓三，张春平，高杨，任刚(昆明市第一人民医院暨昆明医科大学附属甘美医院肝胆胰一科，云南昆明650011)摘要：目的通过对大鼠肝卵圆细胞进行体外培养，建立诱导大鼠肝卵圆细胞分化为胆管上皮细胞的诱导体系。方法通过2AAF／PH建立大鼠肝卵圆细胞活化模型，使用二步酶消化法获得原代肝卵

2、圆细胞，应用2Ong／mL干细胞生长因子及10ng／mL表皮生长因子诱导肝卵圆细胞向胆管上皮细胞分化，并应用流式细胞及免疫荧光观察细胞分化过程中OV-6及CK一19标志的表达变化。结果原代肝卵圆细胞OV一6阳性细胞为(94．30±1．40)％，CK一19阳性细胞为(3．16±1．87)％，诱导后第7代细胞OV-6阳性细胞为(4．97±0．21)％，CK一19阳性细胞为(96．17±1．21)％，差异有显著性(P

3、子及干细胞生长因子可诱导肝卵圆细胞分化为胆管上皮细胞。关键词：大鼠；肝卵圆细胞；胆管上皮细胞；细胞分化中图分类号：R329．21；R一332文献标识码：AThecommitteddifferentiationofrathepaticovalcellsintobiliaryepithelialcellsinvitroCHEN~i-ming，LILi，RANJiang-hua，ZHANGSheng-ning，ZHANG-Lei，SUXiao-san，ZHANGChun—ping，GAOYang，REN-Gang(HepatobiliaryDepartment，Ga

4、nmeiAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity,Kunming,Yunnan650011，P．R．China)Abstract：【objective】Toestablishaneffectivemethodtoinducehepaticovalcellsderivedfrom2AAHratmodeldifferentiatetobiliaryepithelialcellsinvitro．【Methods】2AAHratsmodelandtwo—stepcollagenasedi—gestionwereestab

5、lishedtoobtainpfima~OValcells，20nmLSCFand10ng／mLEGFinDMEM—F12culturedmediumwasusedforinducingHOCdifferentiationofbiliaryepithelialcells．flowcytometryandimmunofluorescencewereusedtodetectexpressionofmarker0V一6andCK一19inculturedcells．【ResllIts】I1}leratioofprima~H0CsthatexpressedOV一6an

6、dCK一19was(94．304-1．40)％and(3．16_+1．87)％respectively，whichwassignificantlydiffer—ent(4．97_+0．21)％and(96．17+1．21)％inthe7generationcells，thedifferencesisstatisticallysignificant(P<0．05)，immunofluorescenceconfirmedwidelyexpressedofCK一19．【Conclusi0n】SuccessfullyinducedHOCsdifferentiation

7、ofbiliaryepithelialcellswhichexpressedCK一19．themorphologicalcharacteristicsofinducedcellsareconsistentwithepithelialcells．EGFandSCFcouldinduceH0Cstodiferentiateintobiliaryepithelialcells．Keywor~：rat；hepaticovalcell；biliaryepithelialcell；celldifierentiation肝卵圆细胞被认为是肝脏内的干细胞，首先在催乳素细胞。由

8、于肝脏卵圆细胞具有干细胞的一般大鼠肝脏