高温对小鼠神经元骨架蛋白及热休克蛋白70表达的影响.pdf

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1、高温对小鼠神经元骨架蛋白及热休克蛋白70表达的影响作者：耿晓英，万琪，杨荣军，吴松笛【关键词】高温；神经元；骨架蛋白；热休克蛋白质70【Abstract】AIM:Toobservetheeffectsofhyperthermia(℃)ontheexpressionsofskeletonprotein(βtubulin)andheatshockprotein70(HSP70)ofcorticalneuronsinvitroculturedandexploretheneuroprotectiveeffectofHSP70.METHODS:Thecerebra

2、lcorticalneuronsofembryonicmicewerecultured.Theculturedneuronsweredividedascontrolgroupwhichwasculturedat37℃andhyperthermiagroupwhichwasputinhightemperature(℃)for30min.TheimmunofluorescenceandlaserscanningconfocalimagingwereusedtodetectHSP70andβtubulinexpressionsatdifferenttimepo

3、ints(0,2,6,24,72h)afterhyperthermia.RESULTS:Thefluorescenceintensityofβtubulininhyperthermiagroupwaslowerthanthatincontrolgroup,anditincreasedasrecoverytimewentalong.ThefluorescenceintensityofHSP70informergroupwashigherthanthatinthelatter,anditincreasedfirstlyandthendecreased.The

4、levelofHSP70reachedthehighestlevelat2handremainedahighlevelfor24h.TheexpressionofHSP70wasinnucleusafterhyperthermiaandthenincytoplasmastimewenton.CONCLUSION:Hyperthermiamayleadtothestructuralchangeofthecerebralcorticalneuronprobablythroughinfluencingskeletonproteinstructure.HSP70

5、maybeinvolvedintheprotectionofneuronsinhyperthermia.【Keywords】hyperthermia;neurons;skeletonprotein;Heatshockproteins70【摘要】目的：观察℃环境对体外培养的小鼠皮层神经元骨架蛋白(βtubulin)和热休克蛋白70（HSP70）表达的影响，探讨HSP70的神经保护作用.方法：取小鼠胚胎大脑皮层进行神经元原代培养，将培养好的神经元分为37℃培养的对照组和℃刺激30min后0,2,6,24和72h的高温组.分别进行荧光免疫染色，应用激光共聚焦扫

6、描观察神经元βtubulin和HSP70的表达.结果：℃刺激后，高温组神经元βtubulin荧光强度均低于37℃对照组，且随着恢复时间的延长其荧光强度值逐渐升高.高温组神经元HSP70荧光强度均高于37℃对照组，且随着恢复时间的延长其荧光强度值先升高后降低，于2h时达高峰，24h仍维持在较高的水平.高温可导致HSP70荧光分布转移至细胞核，并随着恢复时间的延长逐渐转移至细胞浆.结论：高温可以导致神经元形态变化，骨架蛋白结构紊乱可能是神经元形态变化的重要原因之一，HSP70可能参与并起到保护作用.【关键词】高温；神经元；骨架蛋白；热休克蛋白质700引言高温

7、环境下，当人体内温度上升到40℃以上时，就会出现中枢神经系统功能障碍如：谵妄、惊厥或昏迷，甚至死亡.但其复杂的详细机制目前仍不清楚.机体在高温环境下受到热应激时，正常的蛋白质合成会受到抑制，但一组高度保守的热休克蛋白（heatshockproteins,HSPs）会迅速合成［1］.热休克蛋白70（heatshockprotein70,HSP70）是热休克蛋白家族中的主要成员之一，是重要的分子伴侣.在各种细胞器中，核仁和细胞膜对热刺激特别敏感，HSP70广泛存在于细胞骨架和核骨架内.为了探讨高温环境下神经元HSP70和βtubulin表达的变化，我们采用体

8、外培养的神经元，模拟高温环境，应用激光共聚焦扫描方法观察了高温刺激对神经元HSP