人参皂甙对应激大鼠肝脏热休克蛋白70表达的影响

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1、人参皂甙对应激大鼠肝脏热休克蛋白70表达的影响：李宁金法吴可人徐涛裘华森【摘要】　　目的研究人参皂甙对应激时肝脏热休克蛋白(HSP)70表达的影响，探讨其抗应激的作用机制。方法54只SD大鼠分为三组:干预组和模型组各24只，分别以人参皂甙溶液或生理盐水灌胃；对照组6只，予正常饮食。采用盲肠结扎穿孔法（cecumligationandperforation，CLP）制作应激模型。分别于造模后6、12、24及72h检测大鼠肝细胞HSP70的表达及血清IL-6水平的变化。结果除12h外，干预组肝细胞H

2、SP70的表达均＞对照组（P＜0.05）。干预组72h肝细胞HSP70表达＞模型组（P＜0.05）。干预组血清IL-6水平整体呈下降趋势，除6h外，各时点明显＜模型组（P＜0.05）。结论人参皂甙可提高应激时大鼠肝细胞HSP70的表达，并可抑制IL-6的产生，减轻炎症反应，保护应激时的机体。【关键词】人参皂甙应激热休克蛋白70白细胞介素6　　【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectandmechanismofpanaxosideontheexpressionofli

3、verheat-shockprotein-70inconditionofstress.Methods54SDratsg/kgviagastrictube,stressmodelgroup（n=24）andnormalcontrolgroup（n=6）.Cecumligatureandperforation(CLP)methododel.TheexpressionofHSP-70andserumconcentrationofIL-6algroupateverytimepointexcept12h,

4、andinstressmodelgroupitishigher(p<0.05)thaninnormalgroupat72hafteroperation.IL-6levelodelgroup12h、72hafterCLP(p<0.05).ConclusionsPanaxosidecanpromotetheexpressionofratlivercellHSP-70soastoprotectbodyunderstressandinhibittheproductionofIL-6insom

5、ematoryreaction.　　【Keyed公司产品）。　　1.3实验方法　　应激模型制备：大鼠模型制备前12h禁食不禁水，称重后用3%戊巴比妥腹腔注射（45mg/kg）麻醉，仰卧固定于手术台上，腹部脱毛消毒后，取下腹正中切口进腹，暴露盲肠后轻提出，用4号线环行结扎盲肠游离端1/3处（长约1.5cm），注意避免损伤回盲部系膜血管，保持肠道畅通，用16号针头在结扎端贯通穿刺2次，挤出少量粪便，将肠管回纳入腹腔，用1号线单层连续缝合腹膜和皮肤，关腹，术后立即于双侧腹股沟皮下各注射1ml生理盐水，

6、以补充术中液体丢失。动物分组及处理：将动物随机分为对照组（n=6）、模型组（n=24）及干预组（n=24）。干预组大鼠自由饮食，并以50mg/kg的0.5%人参皂甙溶液灌胃，1次/d；模型组以等量生理盐水灌胃；对照组自由饮食。喂养7d后模型组及干预组行CLP，术后继予灌胃，术后6、12、24、72h分批麻醉后处死，每个时间点6只（自然死亡者抛弃），对照组在72h处死。均下腔静脉采血1.5ml测定IL-6含量，并切取肝脏，将肝脏标本置于10%福尔马林中固定、保存。血液标本分置于离心管中，分别标记，

7、放入37℃水浴箱内水浴0.5h，红细胞等凝集沉积后，离心3000rpm、10min，吸取上清液，标记后置于-20℃冰箱内冷冻保存待测。　　1.4观测指标及检测方法　　血清IL-6测定：酶联免疫吸附（ELISA）法测定，试剂购自博士德公司，严格按照试剂盒说明操作。免疫组化检测肝细胞HSP70的表达：Envision法免疫组化染色，光镜下观察HSP70的表达，结果用HPIAS-1000型高清晰度彩色病理图文报告分析系统在低倍镜下计算阳性面积百分比(%)，每张切片随机选取5个视野，求平均值。　　1.5

8、统计学方法　　应用SPSS13.0统计软件，实验数据以(x±s)表示，采用单因素方差分析处理，样本均数间两两比较用q检验（SNK法）。取双侧P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果模型组大鼠于模型制备后6h死亡2只，72h死亡1只，抛弃，其余组大鼠无死亡。　　2.1肝脏HSP70的表达　　对照组大鼠肝小叶结构完整清晰，肝细胞形态结构正常，肝窦清晰，窦内上皮细胞、枯否细胞均未见明显变化，汇管区小叶间动静脉、小叶间胆管结构清晰，HSP70主要表达在汇管区周围的肝细胞浆，呈放射状，表达水平低，