人参皂甙rb1对应激大鼠肝脏热休克蛋白70和蛋白激酶c的影响及相关性研究

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1、人参皂甙Rb1对应激大鼠肝脏热休克蛋白70和蛋白激酶C的影响及相关性研究【摘要】：［目的］研究人参皂甙Rb1对应激大鼠肝脏HSP70（热休克蛋白质70）和PKC（蛋白激酶C）的影响及两者的关系。［方法］56只SD（SpragueDain、60min及180min定点处死实验动物，收集肝脏标本，应用ELISA法测定大鼠肝细胞HSP70的表达及PKC的水平。［结果］人参皂甙30min组和60min组与生理盐水组比较，HSP70表达明显较高（P<0.05）；人参皂甙60min组PKC水平较生理盐水组高，有显著性差异（P<0.05）

2、；大鼠肝脏的PKC水平与HSP70的表达进行线性回归分析显示两者呈显著的正相关。［结论］人参皂甙Rb1可以提高应激时大鼠肝脏HSP70的表达和PKC水平提高，且HSP70的表达与PKC水平的变化呈正相关。【关键词】人参皂甙Rb1；应激；热休克蛋白质70；蛋白激酶C　　Abstract：［Objective］TostudytheeffectofginsenosideRb1onliverheatshockprotein70andproteinkinaseCandtherelationshipbetoperatedgroup.Putthese

3、ratstodeathat30min,60minand180min,extractliveranddraepointsofginsenosidesandthesalinegroup,60minginsenosidegroupishigherthanthesalinegroup.Thereisasignificantdifference(P<0.05).parisonofginsenosidesandsaline30minand180minisnosignificantdifference(P>0.05).(2)TopareHSP

4、70atdifferenttimepointsofginsenosidesandthesalinegroup,30minand60minginsenosidegroupsarehigherthanthesalinegroup.Thereisasignificantdifference(P<0.05).parisonofginsenosidesandsaline180minisnosignificantdifference(P>0.05).(3)ThelinearregressionanalysisofthelevelofPKCa

5、ndtheexpressionofHSP70shoovementoftheexpressionofHSP70andthelevelofPKCareinsignificantpositivecorrelation.　　Keyl/kg，生理盐水组注射生理盐水1ml/kg，30min后腹腔注射10%水合氯醛0.4ml/100g（400mg/kg）麻醉。　　1.4实验方法　　250u/ml肝素钠按2～4ml/kg静脉注射全身肝素化。将大鼠平卧位固定于手术台上，手术区备皮，PVP碘消毒，铺巾。常规手术操作沿腹白线作约2.5cm的切口,暴露肝脏,轻

6、轻游离肝动脉、门静脉、胆总管,用无创伤微血管夹夹闭肝十二指肠韧带，阻断入肝血流,造成肝脏缺血,30min后松开微血管夹,恢复血供。术后立即于双侧腹股沟皮下各注射1ml生理盐水，以补充术中液体丢失。操作过程中所有动物腹腔注射37℃生理盐水10ml，以保持血液动力学的稳定。术后分别于30、60、180min处死后取肝脏标本，称重0.1g左右,放入匀浆器,加入细胞裂解液1ml,0℃冰浴环境中手工匀浆至肝脏组织完全磨碎溶解。将匀浆液倒入离心管，于4℃低温离心器离心（20000rpm，20min），吸取上清液，标记后置于-80℃冰箱内冷冻保存。　　1

7、.5观测指标及检测方法　　HSP70及PKC测定：酶联免疫吸附(ELISA)法测定,试剂购自武汉华美生物工程有限公司，严格按照试剂盒说明书操作。　　1.6统计方法　　应用SPSS17.0统计软件包进行统计分析处理，实验数据以x±s表示，样本均数间两两比较用q检验（SNK法）。取双侧P<0.05为统计学有显著性差异。　　2.2肝脏PKC水平　　模型组大鼠肝脏PKC水平较假手术组明显增高，与假手术组比较有显著性差异（P<0.05），造模成功。人参皂甙60min组PKC水平较生理盐水组高，有显著性差异（P<0.05），说明人参皂

8、甙Rb1在肝脏缺血再灌注后相应时间点能提高HSP70的表达。而30min和180min两组分别比较无明显差异（P>0.05），说明人参皂甙Rb1在肝脏缺血再灌注后相应时间点