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时间:2018-11-01
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1、人参皂甙Rb1对应激大鼠肝脏热休克蛋白70和蛋白【摘要】:[目的]研究人参皂甙Rb1对应激大鼠肝脏HSP70(热休克蛋白质70)和PKC(蛋白激酶C)的影响及两者的关系。[方法]56只SD(SpragueDain、60min及180min定点处死实验动物,收集肝脏标本,应用ELISA法测定大鼠肝细胞HSP70的表达及PKC的水平。[结果]人参皂甙30min组和60min组与生理盐水组比较,HSP70表达明显较高(P<0.05);人参皂甙60min组PKC水平较生理盐水组高,有显著性差异(P<0.05);大鼠肝脏的PKC水平与HSP70的表达
2、进行线性回归分析显示两者呈显著的正相关。[结论]人参皂甙Rb1可以提高应激时大鼠肝脏HSP70的表达和PKC水平提高,且HSP70的表达与PKC水平的变化呈正相关。【关键词】人参皂甙Rb1;应激;热休克蛋白质70;蛋白激酶C Abstract:[Objective]TostudytheeffectofginsenosideRb1onliverheatshockprotein70andproteinkinaseCandtherelationshipbetoperatedgroup.Puttheseratstodeathat30min,60minand1
3、80min,extractliveranddraepointsofginsenosidesandthesalinegroup,60minginsenosidegroupishigherthanthesalinegroup.Thereisasignificantdifference(P<0.05).parisonofginsenosidesandsaline30minand180minisnosignificantdifference(P>0.05).(2)TopareHSP70atdifferenttimepointsofginsenoside
4、sandthesalinegroup,30minand60minginsenosidegroupsarehigherthanthesalinegroup.Thereisasignificantdifference(P<0.05).parisonofginsenosidesandsaline180minisnosignificantdifference(P>0.05).(3)ThelinearregressionanalysisofthelevelofPKCandtheexpressionofHSP70shoovementoftheexpres
5、sionofHSP70andthelevelofPKCareinsignificantpositivecorrelation. Keyl/kg,生理盐水组注射生理盐水1ml/kg,30min后腹腔注射10%水合氯醛0.4ml/100g(400mg/kg)麻醉。 1.4实验方法 250u/ml肝素钠按2~4ml/kg静脉注射全身肝素化。将大鼠平卧位固定于手术台上,手术区备皮,PVP碘消毒,铺巾。常规手术操作沿腹白线作约2.5cm的切口,暴露肝脏,轻轻游离肝动脉、门静脉、胆总管,用无创伤微血管夹夹闭肝十二指肠韧带,阻断入肝血流,造成肝脏缺血,30min
6、后松开微血管夹,恢复血供。术后立即于双侧腹股沟皮下各注射1ml生理盐水,以补充术中液体丢失。操作过程中所有动物腹腔注射37℃生理盐水10ml,以保持血液动力学的稳定。术后分别于30、60、180min处死后取肝脏标本,称重0.1g左右,放入匀浆器,加入细胞裂解液1ml,0℃冰浴环境中手工匀浆至肝脏组织完全磨碎溶解。将匀浆液倒入离心管,于4℃低温离心器离心(20000rpm,20min),吸取上清液,标记后置于-80℃冰箱内冷冻保存。 1.5观测指标及检测方法 HSP70及PKC测定:酶联免疫吸附(ELISA)法测定,试剂购自武汉华美生物工程有限公司,严
7、格按照试剂盒说明书操作。 1.6统计方法 应用SPSS17.0统计软件包进行统计分析处理,实验数据以x±s表示,样本均数间两两比较用q检验(SNK法)。取双侧P<0.05为统计学有显著性差异。 2结果 2.1肝脏HSP70表达 模型组大鼠肝脏HSP70表达较假手术组明显增高,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05),造模成功。人参皂甙30min组和60min组与生理盐水组比较,HSP70表达明显较高(P<0.05),说明人参皂甙Rb1在肝脏缺血再灌注后相应时间点能提高HSP70的表达。而180min两组比较无明显差异(P>
8、;0.05),说明人参皂甙Rb1在肝脏缺血再灌注后相应时间点对HS
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