针刺后海穴对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA1区突触素蛋白表达和超微结构的影响.pdf

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1、第32卷第2期天津中医药大学学报Vo1．32No．22013年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicineJun．2013·实验研究·针刺后海穴对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA1区突触素蛋白表达和超微结构的影响术张学君，刘静，林雨芳，林如辉，林栋，陈采益，吴强摘要：【目的]观察针刺后海穴对血管性痴呆大鼠学习记忆功能、海马CA1区突触素蛋白表达及超微结构的影响。[方法]将48只sD大鼠按随机数字表法随机分为空白组、模型组和针刺组，每组16只，采用双侧颈总动脉永久性结扎(2一vo)方法制造血管性痴呆模型，针刺后海穴3个疗程后

2、，采用Morris水迷宫、免疫组化及电镜技术观察各组大鼠学习记忆功能、海马CA1区突触素蛋白表达及神经元超微结构的变化。[结果】与空白组和模型组比较，针刺组逃避潜伏期、原平台象限停留时间和大鼠海马CA1区突触素蛋白表达差异均有统计学意义(尸

3、5文献标识码：A文章编号：1673—9043(2013)02—0087-05针灸临床治疗疾病时，多采用多穴疗法，然而1材料与方法穴位配合使用时，穴位之间是协同亦或抑制作用无1．1动物及分组SPF级SD雄性大鼠(23月龄，法明确，这对针灸机制的研究殊为不利。目前，单穴体质量200～250g)80只，购于上海斯莱克实验动物的应用日益增多，较之多穴疗法，可较好阐释穴位公司，在福建中医药大学实验动物中心按SPF级环的治疗效应。有研究表明，针刺单穴可影响衰老相境喂养。Morris水迷宫筛选学习记忆良好的大鼠关l生基因片段的表达，从而起到抗衰老的作用[1]。课48只，采用随机数字表法随机分为空白组、模型组

4、题组前期观察到针刺长强单穴能明显改善认知障和针刺组，每组16只。碍【2_]】。本研究观察后海穴(相当于人身上的“长强1．2血管性痴呆大鼠模型制备采用2-VO法(永穴”)对血管l生痴呆大鼠突触素(SYN)蛋白表达和神久性结扎双侧颈总动脉)制备血管性痴呆模型。造经元超微结构变化的影响，探讨针刺后海单穴对血模前将大鼠置于鼠笼中禁食12h，同时禁水4h。麻管性痴呆大鼠学习记忆功能障碍的影响机制。醉时用10％的水合氯醛(4mL／kg)行腹腔注射，造模过程中监测大鼠生命体征，如呼吸、心跳等。将大鼠基金项目：国家自然科学基金资助项目(81202764)；福建省仰卧位固定于操作台，备皮(去颈正中部毛)，用75

5、％科技计划重点项目(2012Y0045)；福建省自然基乙醇消毒，沿皮下行颈部正中切口(约2—2．5cm)，金资助项目(2010J0l190)；福建省教育厅资助项再钝性分离皮下组织，充分暴露气管，于气管两侧目(JK2012022)。用眼科镊逐层分离出在双侧胸锁乳突肌内侧与颈作者单位：350122福建中医药大学(张学君，林如辉，林栋，前肌交界三角区域内的颈总动脉(注意分离过程中陈采益，吴强)需小心操作，切勿伤及与之相邻的交感神经和迷走643000四川省自贡市中医院(刘静)神经)，后以3—0缝合线结扎双侧颈总动脉，最后用350009福州市第一医院(林雨芳)作者简介：张学君(1981一)，男，讲师，主

6、要从事针灸治疗脑4-0缝合线缝合伤口并涂上庆大霉素，放归鼠笼。待病的研究。大鼠苏醒后给予正常饮食，监测呼吸、心跳等生命通讯作者：吴强，Emaihwq2033@yahoo．corn．cn。体征，同时观察其行为变化。3组大鼠均在相同条件87第32卷第2期天津中医药大学学报V01．32No．22013年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicineJun．2013下饲养。手术6周后进行Morris水迷宫实验，记录枕骨大孑L往前依次剪开皮肤，分开颅骨，完全暴露每只大鼠平均逃避潜伏期，求得空白组平均值与标脑组织后用弯镊剥离脑膜及神经，轻轻

7、分离出脑组准差，按“空白组平均值+标准差×2”的标准，平均逃织和颅骨，将取出的脑组织置于4％多聚甲醛液体避潜伏期大于此值的大鼠判为学习记忆障碍，即为中。参照Paxinos等的大鼠脑立体定向图谱[6]，冠状血管性痴呆大鼠模型。面切取前囟一3．14liflm一6-3mm部分约3mm厚脑1．3治疗片，用于行SYN阳性细胞数的免疫组化检测，最后1．3．1穴位选择后海穴参照《实验针灸学》中定将大鼠尸体及剔除