BDNF 和 TERT 联合转染 BMSCs 对血管性痴呆大鼠学习记忆功能恢复及海马 CA1 区超微结构的影响-论文.pdf

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1、第2O卷3期天津医科大学学报V01．20．No31722014年5月JournalofTianjinMedicalUniversityMav．2Ol4文章编号1006—8147(2014)03—0172—05参；赫BDNF和TEnT联合转染BMSCs对血管性痴呆大鼠学习记忆功能恢复及海马CA1区超微结构的影响王菲’，常光明，耿鑫。(1．天津医科大学总医院神经内科，天津300052；2．天津医科大学总医院检验科，天津300052；3．天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系，教育部免疫微环境与疾病重点实验室，天津300070)摘要目的：研究脑源性神经营养因子(BDNF)

2、和端粒酶逆转录酶(TENT)联合转染的骨髓基质干细胞(BMSCs)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能恢复的作用，进一步探讨VD的有效治疗途径。方法：经大鼠股骨分离并鉴定BMSCs，构建pLXSN—TERT重组子后转化至BMSCs，软琼脂克隆形成实验检测体外培养的TEnT—BMSCs的成瘤性。应用Ad5一BDNF转染TEnT—BMSCs，构建BDNF—TEnT联合转染的BMSCs。将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组：对照组、VD组、BMSCs组、BDNF—TEnT—BMSCs组。采用两血管阻断法制备VD模型。采用Morris水迷宫测试方法测试各组大鼠空间学习记忆力。

3、应用RT—PCR和Westernblot方法分别检测各组大鼠海马CAI区BDNF、TrkB、SYN基因mRNA和蛋白袁达情况，应用透射电镜观察各组大鼠海马CA1区超微结构变化。结果：行为学实验Morris水迷宫测试结果及超微病理透射电镜观察均显示BMSCs和BDNF—TEnT—BMSCs对血管性痴呆大鼠有改善作用，且BDNF—TERT—BMSCs较BMSCs的作用更为显著。荧光实时定量RT—PCR和Westernblot结果显示，BMSCs组和BDNF—TEnT—BMSCs组中BDNF、TrkB、SYNmRNA及蛋白表达水平均较痴呆模型组增高(P<0．05)，且BDNF—

4、TEnT—BMSCs组较BMSCs组增加更为显著，差异有统计学意义(P<0．05)。结论：BDNF—TEnT联合转染BMSCs较普通的BMSCs对VD有更好的治疗效果，可明显改善VD大鼠的学习记忆功能的恢复。关键词血管性痴呆；骨髓基质干细胞；脑源性神经营养因子；端粒酶；突触素；大鼠中图分类号R743文献标志码ABMSCsco—-transfectedwithBDNFandTERTimprovetheabilityofcognitionandultra-structureinthehippocampalCA1regionoftheratswithvasculardement

5、iaWANGFei，CHANGGuang-ming，GENGXin(1．DepartmentofNeurology，GeneralHospital，TianjinMedicalUniversity，Tianjin300052，China；2．DepartmentofClinicalLaboratory，GeneralHospital，TianjinMedicalUniversity，Tianjin300052，China；3．DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，KeylaboratoryofImmuneMicroenvi

6、ronmentandDiseasesofMinistryofEducation，TianjinMedicalUniversity，Tianjin300070，China)AbstractObjective：TostudytheeffectsofBMSCsco—transfectedwithTERTandBDNFontheexpressionofBDNF，TrkBandSYNinhippocampalCA1regionofratsmode1withvasculardementiarvD1．Methods：RatBMSCswereisolatedandidentified．t

7、hentransfectedbypLXSN—TERTrecombinant．ColonyformationassayinsoftagarwasusedtodetectthetumorigenicityofBMSCsnvitro．TERT—BMSCsweretransfectedwithAd5一BDNF．FortymaleWistarratswererandomlydividedintofourgroupsf10ratsinnormaleontrolgroup．10indementiamodelgroup，10inBMSCsgr