空间学习记忆训练对大鼠海马 Caveolin-1 蛋白表达的影响.pdf

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1、第34卷第6期大连大掌学报Vb1．34NO．62013年12月JOURNALOFDALIANUNⅣERSITYDec．2013空间学习记，IZi／ll练对大鼠海马Caveolin．1蛋白表达的影响嵇志红，邹伟2(1．大连大学医学院，辽宁大连116622；2．辽宁师范大学生命科学院，辽宁大连116029)摘要：探讨空间学习记忆训练后大鼠海马Caveolin．1(Cav．1)蛋白表达的变化。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力，WesternBlot方法检测大鼠海马Cav．1蛋白表达的变化。结果显示：水迷宫实验中，与青年训练组比，老年训练组大鼠的

2、逃避潜伏期明显延长(P

3、8．2395(2013)06．0035．03收稿日期：2013．10．15基金项目：国家自然科学基金资助项目(30970353)。作者简介：嵇志红(1964．)，女，副教授，研究方向：神经生物学。Caveolae是细胞质膜上特殊的凹陷结构(胞膜Spague—Dawley大鼠各16只，购于大连医科大学SPF窖)，含有丰富的胆固醇和鞘磷脂。Caveolin．1(Cav一1)实验动物中心。青年雄性大鼠随机分为2组：青年对是Caveolae的主要结构组分和标志蛋白，在胆固醇照组(YC)，青年训练组(YT)。老年大鼠也随机分运输、膜组装、信号转导和肿瘤发生等过程中发挥

4、着为2组：老年对照组(OC)，老年训练组(OT)。各重要的作用[1-21。研究表明，在胚胎发育过程中脑内组大鼠严格按饲养条件分笼饲养，标准鼠食，自由饮几乎没有Cav一1蛋白的表达，但生后Cav—l表达逐渐水，自然昼夜。增加，成年后表达下调，表明Cav—l的表达与生后脑1．2试剂与仪器发育密切相关【3]。近年研究还发现，Cav一1与脑功能的生理和病理变化有关，它影响神经发育、突触可塑抗兔caveolin．1(N一20)多克隆抗体购自美国性、神经退行性疾病的发生等过程】。有实验表明，SantaCruz公司；HRP．抗兔IgG与抗鼠actin单克隆Y_迷宫分辨学习

5、训练后大鼠皮层内Cav．1表达显著抗体购自武汉博士德生物公司；ECLTM试剂购于美升高，提示Cav．1可能在分辨学习记忆过程中起作用国AmershamBiosciences公司；其它试剂为国产分析【6]。但目前为止，有关Cav一1是否参与空间学习记忆纯。DMS一2型Morris水迷宫(中国医学科学院药物过程及其作用机制尚未见报道。本实验采用Morris研究所)；全自动酶标仪(SUNRJSETECAN公司)；水迷宫对青年和老年大鼠进行空间学习记忆训练，通MV-II型双垂直板式电泳槽和PS．9型半干式转移电过Westernblot检测空间学习记忆训练后Cav一1

6、表达泳仪(大连竞迈生物科技有限公司)；SuperT21离心的变化，为探讨Cav—l在空间学习记忆过程中的作用机(美国索福公司)。提供一定的实验依据。1-3Morris水迷宫空间学习记忆训练l材料与方法共历时6d。前5d进行定位航行试验，隐蔽平1．1实验动物与分组台置于东南象限中央水面下lcm，每只大鼠每天训练4次，每次120S，两次间隔20min，仪器自动记3月龄(青年)与l8月龄(老年)健康雄性录从入水到找到隐蔽平台并立于其上所需时间(逃避36大连大学掌报第34卷潜伏期)，数据取4次均值。第6d进行空间探索试1．5数据统计分析验，撤去平台，然后在西北象限(

7、原平台对侧象限)数据以表示，应用SPSS13．0统计软件进行入水点将大鼠面向池壁放入水中，测定120s内在4统计学分析，组问差异用t检验，P<0．05表示有显著个象限的游泳时间，其中东南象限(原平台象限)的性差异。时间为记忆保持时间，同时记录大鼠2min内穿过原平台象限的次数。2结果1．4Westernblot分析2．1青年与老年大鼠空间学习记忆能力的变化实验结束后断头处死各组大鼠，冰上分离海马，称重后置于脑蛋白裂解液中，冰上匀浆裂解1～2h，4~C水迷宫定位航行实验中，随着训练天数增加，青冷冻离心机10000r／min离心15min，取上清，年组与老年组大

8、鼠的逃避潜伏期均呈缩短趋势，但青Bradford法进