养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马ca1区突触素及微管相关蛋白-2表达的影响

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1、中图分类号：R749论文编号：HBLG2015-278UDC：密级：公开硕士学位论文养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触素及微管相关蛋白-2表达的影响作者姓名：刘洋洋学科名称：神经病学研究方向：脑血管病学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期：2015年5月10日申请学位类别：临床医学硕士导师姓名：李世英主任医师副教授单位：华北理工大学附属医院刘斌主任医师教授单位：华北理工大学附属医院论文评阅人：元小冬教授单位：开滦总医院陈乃耀教授单位：华北理工大学附属医院论文答辩日期：2015年6月6日答辩委员会主席：元小冬教授关键词：养血清脑颗粒；血管

2、性痴呆；海马；微管相关蛋白-2；突触素唐山华北理工大学2015年6月EffectofYangXueQingNaoKeLionsynaptophysinandmicrotubule-associatedprotein2inCA1AreaofHippocampusofVascularDementiaRatsDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofClin

3、icMedicinebyLiuYangyang(NeurologyMedicine)ProfessorLishiyingSupervisor:ProfessorLiuBinJune,2015摘要摘要目的观察血管性痴呆（vasculardementia,VD）模型大鼠海马CA1区突触素（synaptophysin,SYN）及微管相关蛋白-2（microtubule-associatedprotein2,MAP-2）的表达及养血清脑颗粒对其表达的影响，探讨养血清脑颗粒对血管性痴呆的作用机理及突触可塑性的影响。方法1将健康的雄性SD大鼠90只，随机分为对照组

4、、血管性痴呆模型组（模型组）及养血清脑颗粒治疗组（治疗组），各组大鼠又随机分为1周、2周、4周、8周、12周5个亚组（n=6）。2采用改良的Pulsinelli四血管阻断法（four-vesselocclusion,4-VO）制作血管性痴呆大鼠模型。3治疗组模型制备成功后每日给予养血清脑颗粒3.2g/kg灌胃，1次/日。4分别在术后1周、2周、4周、8周和12周采用Morris水迷宫法检测大鼠的学习及记忆能力，并在规定的时间段内处死大鼠取脑组织。5采用HE染色法观察大鼠海马CA1区病理组织学变化以及电子显微镜观察大鼠海马CA1区突触超微结构。6采用免疫

5、组化法检测大鼠海马CA1区SYN及MAP-2蛋白表达的情况，采用OLYMPUS摄像显微镜（400×）进行摄像，最后用MOTAC医学数码图像系统进行分析。7以Excel数据库整理后用SPSS17.0统计软件进行统计分析，所得数据以均数±标准差（xs）表示，多组间比较采用单因素方差分析（one-wayANOVA），以P＜0.05认为有统计学意义。结果1各组大鼠随着训练天数的增加，平均逃避潜伏期均缩短，在前2天，各组大鼠平均逃避潜伏期未见明显变化（P＞0.05），差异无统计学意义。从第3天起，与对照组比较，模型组大鼠平均逃避潜伏期明显延长（P＜0.05），

6、到第5天一直保持这种差异。与模型组比较，治疗组大鼠平均逃避潜伏期明显缩短（P＜0.05），到第5天两组间差异更显著（P＜0.01），具有统计学意义。在撤走安全平台后，与对照组比较，模型组大鼠穿越平台次数显著减少（P＜0.05），与模型组比较，治疗组大鼠穿越平台次数增加（P＜0.05），差异具有统计学意义。2对照组大鼠海马CA1区神经细胞整齐排列，神经元数量多，模型组大鼠海马CA1区神经细胞排列层次不清，神经元数量明显减少，可见核固缩、核碎裂及核溶解现象，治疗组大鼠海马CA1区神经细胞与模型组比较有明显的改善，细胞排列较紧密，神经元细胞数量较前增多，核固

7、缩、核碎裂现象较前减少。3电镜下观察，对照组大鼠海马CA1区神经元细胞膜及胞核结构完整，线粒体丰富，细胞核内染色质分布均匀，突触前后膜边界清楚，轮廓完整，突触结构清晰可见。模型组大鼠海马CA1区神经元细胞-I-华北理工大学硕士学位论文膜及胞核结构欠清晰，线粒体可见部分膨胀甚至破裂，数量较前明显减少呈空泡状态，突触前膜及突触后膜破损，突触间隙模糊不清。治疗组大鼠海马CA1区神经元损害较模型组有所改善，胞膜及胞核结构较完整，线粒体数量较前增多，突触前后膜边界清楚，突触间隙变小。4对照组各时间点均可见多量的SYN及MAP-2阳性细胞的表达，各时间点比较无显著

8、性差异（P＞0.05）。与对照组相比，模型组各时间点SYN及MAP-2蛋白表达均下降（P＜0.