纤维寡糖和益生菌对热应激肉鸡营养物质消化、肠黏膜氨基酸转运载体mRNA表达和氮排放的影响.pdf

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动物营养学报2014，26(9)：2772—2778ChineseJournaloyAnimalNutritiondoi：10．3969／j．issn．1006—267x．2014．09．040纤维寡糖和益生茵对热应激肉鸡营养物质消化、肠黏膜氨基酸转运载体mRNA表达和氮排放的影响洪奇华宋娟胡彩虹石波。刁其玉(1．浙江大学动物科学学院，杭州310058；2．中国农业科学院饲料研究所，北京100081)摘要：本试验旨在研究益生菌(PRO)和纤维寡糖(COS)对热应激肉鸡营养物质消化、肠黏膜氨基酸转运载体mRNA表达和氮排放的影响。将900羽21日龄罗斯(Ross)308肉鸡分为5个组：热中性(TN)组、热应激(HS)组、益生菌(HS+0．15％PRO)组、纤维寡糖(HS+0．15％COS)组、合生素(HS+SYN，SYN=0．15％PRO+0．15％COS)组。热中性组鸡舍温度22℃；其余各组鸡舍为循环热应激，温度08：00一l8：o0为33℃，l8：00一次日08：00为22℃。饲养试验期为21d。结果如下：1)与热中性组相比，热应激组肉鸡平均日增重和平均日采食量分别显著降低10．65％(P<0．05)和8．04％(P<0．05)，单独添加益生素或者纤维寡糖对肉鸡平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著影响(P>0．05)；热应激组粗蛋白质和粗纤维表观消化率显著下降(尸<0．05)；热应激组氮摄入量和氮沉积量显著降低(P<0．05)，氮排泄量和排泄率及排泄物氨态氮和尿酸含量显著提高(P<0．05)；热应激组排泄物脲酶活性和鸡舍氨气浓度显著提高(P<0．05)；热应激组肠黏膜基础氨基酸运载体(rBAT)、YL氨基酸运载体一2(LAT2)、阳离子氨基酸运载体一l(CAT1)和阳离子氨基酸运载体一4(CAT4)mRNA表达量显著降低(P<0．05)。2)与热应激组相比，益生菌组和纤维寡糖组粗蛋白质表观消化率显著升高(P<0．05)，氮排泄量和氮排泄率显著降低(P<0．05)，氮沉积量显著升高(P0．05)。时在鸡舍均匀分布点测定，每个鸡舍每个重复的2．2益生菌和纤维寡糖对热应激肉鸡营养物质正中间布1个点，测定距地面0．6和0．9m高度的表观消化率的影响氨气浓度，取平均值，计算日平均氨气浓度。由表4可知，与TN组相比，HS组肉鸡粗蛋白饲养试验结束后7d，全收粪法收集粪尿排泄质和粗纤维表观消化率显著下降(P<0．05)。与物，排泄物中脲酶活性根据步长英9的方法测定，HS组相比，HS+PRO、HS+COS、HS+SYN组粗蛋主要步骤是称取适量样品于比色管中，先用尿素白质表观消化率均显著升高(P<0．05)；HS+SYN磷酸盐缓冲液处理，恒温水浴摇匀后，加入组肉鸡粗纤维表观消化率显著升高(P<0．05)，且0．1mol／LHC1溶液，最后用氢氧化钠标准溶液滴与TN组无显著差异(P>0．05)。 9期洪奇华等：纤维寡糖和益生菌对热应激肉鸡营养物质消化、肠黏膜氨基酸⋯⋯2775同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0．05)。 2776动物营养学报26卷氮摄入量Nintake／[g／(d·只)]5．07+0．124．67±0．154．83_+0．124．73_+0．144．90_+0．12氮排泄量Nexcretion／[g／(d·只)]2．32_+0．083．14±0．132．60_+0．11bc2．74_+0．O92．42_+0．11氮排泄率Nexcretionrate／％45．70_+3．1867．30_+3．3r53．80_+2．7458．00_+3．5949．30_+2．08。氮沉积量Nretention／[g／(d·只)]2．75_+0．091．53±0．092．23_+0．061．99_+0．122．48_+0．09氨态氮NH3-N／[wg／(d·只)]120．30_+5．43166．90±8．16136．70_+7．06157．80_+6．70128．40+6．25尿酸UN／[g／(d·只)]3．05_+0．113．92_+0．123．67_+0．153．54_+0．133．42_+0．15氨气NH／(mg／m)4．06_+0．19“5．84_+0．225．30+0．215．12+_0．184．61±0．18脲酶Urease／[rag／(g·rain)]0．063+_0．0060．095+_0．0090．086_+0．0070．084+0．0090．075±0．0l善肉鸡肠道微生态有关。3讨论肠腔中营养物质的吸收，主要依赖于上皮细热应激对肉鸡肠道消化吸收功能的影响已有胞刷状缘和基底膜不同的载体转运系统，这些转较多报道。Dibner等报道，热应激使肉鸡肠上运系统由不同的转运载体所组成，转运载体的数皮细胞对DL一蛋氨酸的吸收率显著降低。Geraert量和活性受到激素、饲粮营养及神经内分泌等因等¨报道，32℃热应激组肉鸡体蛋白质沉积率显素的调控。本文检测了肉鸡氨基酸转运载体著低于22℃组。杨全明等发现，肉鸡的蛋白质CAT1、CAT4、rBAT与YLAT2mRNA的表达量，摄入量、干物质排泄量、氮排泄量和尿酸排泄量均CAT1(系统Y)和CAT4(系统Y)的主要功能是与温度呈显著负相关。Larbier等¨副的试验表明，维持细胞内碱性氨基酸代谢的正常水平，而rBAT肉鸡对豆饼和菜籽饼的真蛋白质消化率和真氨基(系统b)与)，LAT2(系统YL)分别位于肠上酸消化率均在高温下降低。本试验结果表明，热皮细胞的刷状缘和基底膜，负责碱性氨基酸的吸应激使肉鸡粗蛋白质和粗纤维表观消化率均降收和转出。本试验发现，热应激使肠黏膜氨基低；单独添加益生菌和纤维寡糖或组合添加使肉酸转运载体rBAT、YLAT'2、CAT1和CAT4mRNA鸡粗蛋白质和粗纤维表观消化率不同程度提高，表达下调，说明热应激导致肉鸡肠道对氨基酸的其中HS+SYN组粗蛋白质和粗纤维表观消化率均吸收能力下降。本试验中，HS+SYN组饲粮显著提高至与TN组无显著差异。结果提示，益生菌和提高了空肠刷状缘rBATmRNA表达，而对于基底纤维寡糖不同程度地缓解了热应激给肉鸡带来的膜的yLAT2mRNA的表达量没有影响，提示可能不良影响，两者组合添加效果优于单独添加。益益生菌和纤维寡糖这2种添加剂协同作用对肠腔生菌可改善肠黏膜形态、促进饲料养分消化吸面生理的影响较大。收已有较多报道¨。关于纤维寡糖在畜禽上的研家禽排泄物中含氮物质主要包括尿酸和菌体究报道很少，徐露蓉等¨研究表明，在生长猪饲粮蛋白以及少量的尿素、氨态氮和内源氮。本试验中添加纤维寡糖可刺激结肠肠道有益菌的增殖并表明，热应激使肉鸡氮摄人量和氮沉积量降低，氮抑制有害菌的增殖，改善肠黏膜屏障。本试验中排泄量提高；饲粮中添加益生菌和纤维寡糖，可降纤维寡糖改善热应激肉鸡消化率，可能也和其改低肉鸡氮排泄量及排泄率，增加氮沉积量，表明益 9期洪奇华等：纤维寡糖和益生菌对热应激肉鸡营养物质消化、肠黏膜氨基酸2777生菌和纤维寡糖提高了热应激肉鸡对氮的利用[5]刘程程．B一葡聚糖酶水解紫花苜蓿制备纤维寡糖的率。尿酸是鸡排泄物中最重要的氨生成的前体，研究[D]．硕士学位论文．北京：中国农业科学院，2011：2—8．脲酶可使排泄物中的含氮物质分解产生氨气。步[6]李文立，路静，孙振钧，等．谷氨酰胺对热应激肉鸡抗长英报道，饲粮中添加芽孢杆菌显著降低14日氧化性能的影响[J]．动物营养学报，2011，23(4)：龄和28日龄肉鸡排泄物中脲酶活性。本研究表695-702．明，热应激使粪便氨态氮和尿酸含量以及鸡舍氨[7]冯定远，谭会泽，王修启，等．木聚糖酶对肉鸡肠道碱气浓度增加，HS+COS和HS+SYN组鸡舍氨气浓性氨基酸转运载体mRNA表达的影响[J]．畜牧兽度显著降低，且HS+sYN组鸡舍氨气浓度与TN医学报，2008，39(3)：314—319．组无显著差异，说明益生菌和纤维寡糖这2种添[8]张丽英．饲料分析及饲料质量检测技术[M]．3版．北加剂协同作用能更好地增强小肠对蛋白质的消化京：中国农业大学出版社，2007：52-78．吸收以及对排泄物的固氮作用，降低氨气散发量。[9]步长英．丝兰皂甙、芽孢杆菌对肉鸡生产性能、氮代谢和排泄物氨气散发量的影响[D]．硕士学位论文．泰安：山东农业大学，2008：40-49．4结论[10]DIBNERJJ，ATWELLCA，IVEYFJ．Effectofheat热应激降低了肉鸡营养物质表观消化率和肠sfesson2-hydroxy一4一(methylthio)butanoicacidand黏膜氨基酸转运载体mRNA表达，增加了氮排泄DL—methionineabsorptionmeasuredinvitro[J]．Poul—和鸡舍氨气浓度，提高了排泄物脲酶活性。益生tryScience，1992，71(11)：1900—1910．菌和纤维寡糖不同程度地改善了热应激引起的上[11]GERAERTPA，PADILHAJCF，GUILLAUMINS．述不良影响，两者组合添加效果优于单独添加。Metabolicandendocrinechangesinducedbychronicheatexposureinbroilerchickens：growthperform—参考文献：ance，bodycompositionandenergyretention[J]．[1]OSTROWSKIMEISSNERHT．ThephysiologicalandBritishJournalofNutrition，1996，75(2)：195—204．biochemicalresponsesofbroilersexposedtoshort—[12]杨全明，吴庆鹉，余振华．环境温度对肉用仔鸡尿酸termthermalsgess[J]．ComparativeBiochemistryand排泄及氮代谢影响的研究[J]．畜牧兽医学报，PhysiologyPartA：Physiology，1981，70(1)：1—8．1994，25(2)：109—115．[2]TEMIMS，CHAGNEAUAM，PERESSONR，eta1．[13]LARBIERM，CHAGNEAUAM，GERAERTPA．In-fluenceofambienttemperatureontruedigestibilityofChronicheatexposurealtersproteinturnoverofthreedifferentskeletalmusclesinfinishingbroilerchickensproteinandaminoacidsofrapeseedandsoybeanfed20％or25％proteindiets[J]．TheJournalofNu—mealsinbroilers[J]．PoultryScience，1993，72(2)：trition，2000，130(4)：813—819．289-295．[3]陈燕，冯京海，张敏红，等．环境高温与饲粮粗蛋白质[14]徐子涵，许丽．不同剂型乳酸菌对雏鸡生长性能和小水平对肉鸡生产性能、氮代谢和氮排放的影响[J]．肠黏膜形态的影响[J]．动物营养学报，2011，23动物营养学报，2013，25(1O)：2254—2265．(1O)：1812—1818．[4]SOHAILMU，IJAZA，YOUSAFMS，eta1．Allevia—[15]胡顺珍，张建梅，谢全喜，等．复合微生态制剂对肉鸡tionofcyclicheatsfessinbroilersbydietarysupple—生产性能、肠道菌群、抗氧化指标和免疫功能的影mentationofmannan·oligosaccharideandLactobacil—响[J]．动物营养学报，2012，24(2)：334-341．lus—basedprobiotic：dynamicsofcortisol，thyroidhor—[16]徐露蓉，栾兆双，胡彩虹，等．饲粮中添加纤维寡糖对mones，cholesterol，C—reactiveprotein，andhumoral生长猪生长性能、结肠菌群和肠黏膜通透性的影响immunity[J]．PoultryScience，2010，89(9)：1934一[J]．动物营养学报，2013，25(6)：1293-1298．】938． 2778动物营养学报26卷EffectsofProbioticsandCello-OligosaccharideonNutrientDigestion，mRNAExpressionofIntestinalMucosaAminoAcidTransportersandNitrogenEmissionofBroilersunderHeatStressHONGQihuaSONGJuanHUCaihongSHIBoDIAOQiyuAnimalScienceCollege，ZhejiangUniversity，Hangzhou310058，China；2．FeedResearchIntit“te．ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beo'ing100081，China)Abstract：Thisexperimentwasconductedtostudytheeffectsofprobiotics(PRO)andcello—oligosacc：haride(COS)onnutrientdigestion，mRNAexpressionofintestinalmucosaaminoacidtransportersandnitrogene．missionofbroilersunderheatstress．Ninehundred21一day—oldRoss308broilerswererandomlyallocatedto5groups：thermoneutralzone(HN)group，heatstress(HS)group，probiotics(HS+0．15％PRO)group．cello．oligosaccharide(HS+0．15％COS)groupandsynbiotics(HS+SYN，SYN=0．15％PRO+0．15％COS)group．Birdswereeitherraisedinathermoneutralzone(22℃)inHNgroup，andtheothersweresubjectedtocyclicheatstressbyexposingto33℃from08：00to18：00and22℃from18：00tonextday08：00．Raisingexper．1mentperiodwas21days．Theresultsshowedasfollows：1)comparedwithbirdskeptinHNgroup。averagedailygainandaveragedailyfeedintakeofbroilerssubjectedtoheatstressweresignificantlyreduced10．65％(P<0．05)and8．04％(P<0．05)，respectively．Averagedailygain．averagedailyfeedintakeandfeedtogainratioofbroilerssubjectedtoheatstresswithdietaddedprobioticsorcello—oligosaccharideindividuallywerenotsignificantlydifferent(P>0．05)．ApparentdigestibilityofcrudeproteinandcrudefiberinHSgroupwassig．nificantlydecreased(P<0．05)，nitrogenintakeandnitrogenretentionweresignificantlydecreased(P<0．05)．nitrogenexcretionandnitrogenexcretionrateweresignificantlyincreased(P<0．05)，ammonianitrogen，uricacidcontentsinexcretaandammoniaconcentrationinchickenhouseweresignificantlyincreased(P