热应激和吡虫啉对大豆蚜hsp70和hsc70基因mRNA表达的影响-论文.pdf

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1、昆虫学报ActaEntomologicaSinica，April2014，57(4)：387—394ISSN0454-6296热应激和吡虫啉对大豆蚜hsp70和hsc70基因mRNA表达的影响韩岚岚，朱明贺，董天宇，赵奎军，曲忠诚，吕洋，韩晓旭(1．东北农业大学农学院，哈尔滨150030；2．黑龙江省农业科学院齐齐哈尔分院，黑龙江齐齐哈尔161006)摘要：【目的】昆虫在高温或农药的胁迫下，通过高效表达热休克蛋白(HSP)等建立应激自我保护机制。本研究为从转录组水平上认识大豆蚜却h／sglycines在热应激和吡虫啉胁迫下hs

2、p70和hsc70mRNA表达分子机制，进而寻找自我保护应激反应中的薄弱环节，为大豆蚜的生物防治提供理论基础。【方法】采用同源克隆、RACE技术和实时荧光定量PCR等方法研究不同热激时间和热激后不同恢复时间及不同吡虫啉浓度对大豆蚜4龄若虫hsp70和hsc70的表达影响。【结果】37~C热激后，大豆蚜4龄若虫中h~p70表达量先上调，1h时升至对照组的10．36倍(P<0．05)，然后逐渐下降。同样热激后恢复时间的长短对大豆蚜若蚜中hsp70的表达具有显著影响。热激处理后，大豆蚜若蚜中hsp70立即大量表达，表达量为对照组的8

3、．78倍(P<0．05)，随后表达量下降至对照组水平，而hsc70的表达量并没有显著变化(P>0．05)。大豆蚜若蚜受吡虫啉的胁迫时，其hsp70和hsc70的表达量受吡虫啉的浓度及胁迫的时间的影响，呈现先升高后下降的趋势，具有明显的短期效应。【结论】吡虫啉诱导大豆蚜hsp70和hsc70表达量的上调；而热胁迫对hsp70和hsc70mRNA具有不同的表达模式，高温可以诱导hsp70的表达，但对hsc70没有明显的诱导作用。关键词：大豆蚜；热休克蛋白；吡虫啉；热激；mRNA表达中图分类号：Q966文献标识码：A文章编号：045

4、445296(2014)04-0387-08Efectsofheatshockandimidaclopridontheexpressionsofhsp70andhsc70mRNAintheAphisglyc(Hemiptera：Aphididae)HANLan-Lan，ZHUMing-He，DONGTian—Yu，ZHAOKui-Jun一，QUZhong—Cheng，LUYang，HANXiao—Xu(1．CollegeofAgriculture，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin15

5、0030，China；2．QiqiharSub—academy，HeilongliangAcademyofAgriculturalSciences，Qiqihar，Heilongjiang161006，China)Abstract：【Aim】Insectswillexpressheatshockproteins(HSPs)efficientlytoestablishself-protectionmechanismunderhightemperatureandpesticidestress．Thisstudyaimstoknow

6、themolecularmechanismsofhsp70andhsc70mRNAexpressioninAphisglycinesunderthermalandimidaclopridstressatthetranscriptomelevelandlookforthevulnerablespot．sotoprovidesometheoreticalbasisforbiologicalcontro1．【Methods】Weadoptedthehomology—basedcloning，RACEtechniqueandreal—

7、timefluorescentquantitativePCRmethodstoresearchtheexpressionofhsp70andhsc70inthe4thinstarnymphsofA．glycinesatdifferentheatshocktimeordifferentrecoverytimeafterheatshockandaftertreatmentwithdifferentconcentrationsofimidacloprid．【Results】Thehsp70transcriptionlevelinth

8、e4thinstarnymphsofA．glycinesincreasedfirstafterheatshockat37oC。reaching10．36．foldashighasthatofthecontrol(P<0．05)at1hafterheatshock。andthe