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1、92中国兽医学报2014年1月第34卷第1期ChinJVetSciJan.2014Vo1.34No.1非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响史晓霞,王建国,李玉,宋玉祥,丁红研,韩盈盈,张玉明,殷立恒,王婷婷,张仁和,郭立辉,邓清华,李心慰,李小兵,刘国文,王哲(吉林大学动物医学学院,吉林长春130062)摘要:在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上,通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸(Nonesterifiedfattyacids,NEFAs),运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNF、I
2、L一6和IL一1G的tuRNA表达及其活性的影响。结果显示,NEFAs作用肝细胞9h后,与对照组相比,高浓度NEFAs(1.8mmol/L)组肝细胞q-TNFa、IL-I~的mRNA表达水平显著增加(P%0.05),IL一6的mRNA表达水平在2.4retool/L时极显著增加(P0.05);并且TNFd、IL一1B的活性在NEFAs浓度达到1.8、2.4mmol/L显著高于对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性作用,IL一6
3、的活性在在NEFAs浓度达到1.8mmol/L显著高于对照组(P<0.01),在2.4mmol/L也高于对照组,但差异不显著。结果表明,高浓度NEFAs在一定程度上能引起或加剧奶牛肝细胞炎性反应,可能是导致产后奶牛肝功能炎性损伤主要因素。关键词:非酯化脂肪酸;肝细胞}炎性因子中图分类号:$852.2;$852.7文献标志码:A文章编号:1005—4545(2014)01—0092—05EffectsofNEFAsonexpressionandactivityofinflammatorycytokinesincalfhepatocytesculturedinvi
4、troSHIXiao—xia,WANGJian—guo,LIYu,SONGYu—xiang,DINGHong—yan,HANYing—ying,ZHANGYu—ming,YINLi—heng,WANGTing—ting,ZHANGRen—he,GUOLi—hui,DENGQing—hua,LIXin—wei,LIXiao—bing,LIUGuo—wen,WANGZhe(CollegeofVeterinaryMedicine,JilinUniversi—ty,Changchun130062,China)Abstract:Thisstudyaimedtoinves
5、tigatetheeffectsofnon—esterifiedfattyacid(NEFAs)onex—pressionandactivityofinflammatorycytokinesincalfhepatocytesculturedinvitro.ThetotalRNAwasisolatedfromhepatocytes,whichweretreatedwithdifferentconcentrationsofNEFAsafter9h。andextractioncel1supernatantwasusedforELlSAassay.Theresults
6、showedthatthemRNAlevelsofTNFa,IL一1J3increasedsignificantly(P<0.05)inNEFAs(1.8mmol/L)一trea—ted。andthemRNA1evelsofIL一6increasedsignificantly(P<0.01)inNEFAs(2.4mmol/L)一treatedcomparedwiththecontrolgroup.Inaddition,theactivityofTNFa,IL一18weresignificant—lyhigherthanthatincontrolgroupinN
7、EFAs(1.8mmol/Land2.4mmol/L)一treated,andtheactivityofII一6weresignificantlyhigherinNEFAs(1.8mmol/L)一treatedcomparedwithcontrolgroup(P%0.01).Insummary,thehighconcentrationofNEFAscancauseorexacerbatethein—flammatoryresponseofcalfhepatocytes,maybethefactorswhichcauseinflammatoryinjurytOl
8、iverofpostpartumCOW
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