肝细胞生长因子(hgf)对体外培养的人退变髓核细胞生物学活性的影响

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1、分类号：密级：单位代码：10114学号：200910118肝细胞生长因子(HGF)对体外培养的人退变髓核细胞生物学活性的影响研究生：遗耋坦指导教师：里迅教援申请学位门类级别：医堂亟±专业名称：窆[型堂研究方向：．鲎挂鲎丝塑鱼所在学院：箍三!直废医堂院2012年6月5日学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人己用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确

2、的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：隧趄日期：垄!二年—』角—￡同学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他

3、复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：’盏2锄生论文作者签名：壁煌!垡将捌虢≥建c=—，日期：二主!：年—L月—g—n日期：丝z釜年—厶月—乙H(本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用)山西医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯II英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯III英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯V前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1日IJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l第一部分实验材料与试剂制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3第二部分实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5第三部分实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10第四部分讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30山西医科大学硕．}：学位论文-——————————————————————————————————————————————————————————一中文摘要背景椎间盘退变(intervertebraldiscdegeneration，IVD)是椎间盘突出、椎体滑脱、椎管狭窄等脊柱疾病的首要病因。研究证实，占椎间盘体积l％的髓核细胞在维持正常椎间盘细胞

6、和细胞外基质平衡以及在修复退变的椎间盘过程中发挥着核心作用。肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor，HGF)是人体中重要的细胞因子，存在于多种组织与细胞，发挥促进细胞增殖、基质表达、血管新生、抑制细胞凋亡等作用，在生命的器官发生、形态形成、个体发育以及组织修复中发挥作用。通过肝细胞生长因子对髓核细胞作用，研究髓核细胞增殖活性以及细胞外基质表达变化，为修复退变的椎间盘寻求切实可靠的方法。目的1．探讨肝细胞生长因子(HGF)对体外培养的人退变髓核细胞的生物学作用。2．研究肝细胞生长因子与胰岛素样生长因子联合作用对人退变髓核细胞的影响。方法

7、收集人退变髓核组织标本，分离培养髓核细胞；免疫组织化学法检测髓核细胞II型胶原表达，HE染色观察细胞形态；免疫组化染色观察HGF受体在髓核细胞中表达；设立HGF：0ng／ml、5ng／ml、50ng／ml、500ng／ml组，采用MTT法测细胞生长曲线，筛选HGF最佳作用浓度；选取第3代髓核细胞，实验分HGF组、HGF+IGF组、IGF组、对照组，RT-PCR检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9mRNA表达；流式细胞术测定细胞增殖的周期。结果免疫组化II型胶原染色可见细胞外和胞浆内棕褐色颗粒；HE染色细胞核染成紫色；免疫组化显示髓核细胞表达HGF受体；MTT法

8、提示不同浓度肝细胞生长因子对体外培养的人退变髓核细胞均有明显的促增