兔髓核细胞体外培养和重组人转化生长因子β1对其代谢影响的研究

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1、万方数据中尉脊柱脊髓杂志2006年第16卷第4期ChineseJournalqfSpineand曲ina／c。rd．2006．P01．16，舳4兔髓核细胞体外培养和重组人转化生长因子一131对其代谢影响的研究张传志1，周跃1，李长青1，周琳2，郭国宁。，曹国勇1，李华壮1(1第二墨区大学附属新桥医院骨科400038重庆市；2成都至区总医篪医学试验科610000阳川省战都市【摘要】目的：探讨体外单层和讧体培养兔髓核细胞时的变化及重组人转化牛K吲子一131(rhTGF—Bl，10ng]m1)对其代谢的影响。方法：体外士音养兔髓桩细胞，分为3组。A组，单层培养组；B组，Ⅱ型胶原支架立体培

2、养组；C组，Ⅱ型胶原支架立体培养+rhluF_B1(10ng／m1)组。利用倒置显微镜、扫描电镜、¨PCR、，H—proline掺人法观察髓核绌胞形态学、基因表达水甲和总胶原合成的变化。结果：B、c组兔髓核细胞由A组的多角彤转为类圆形：与A组相比．B组Ⅱ型胶原、集聚蛋白多糖基罔表达水平升高(P<005)，总胶原合成升高(P<00I)。与B组相比，C组Ⅱ型胶原、集聚蛋白多糖、核心蛋白多糖基因表达水平增高(心O()】、P<001、P<005)，总胶娘合成川高(P<0叭)，结论：兔髓核细胞由单层培养转到lI型胶原支架上培养时其丛必表达和总胶原合成增强。rhTGF—B1(10n∥nd)町增

3、强立体培养的兔髓核细胞基罔表达和总胶原台成。【关键词】组织工稃；细胞培养；髓核细胞；重组人转化生长因子B1；兔中圈分类号：0813．1，R6815文献标识码：A文章编号：1004—406X(2006)一04028004CulturinginvitroofnucleuspulposuscellsandtheanabolieeffectinducedbyrhTGF—B1inrabbiffZHANGChuanzhi，ZHOUYue．LIChangqing，etal／／ChineseJournalofSpineandSpinalCord，2006，16f4)：28¨283【Abstract

4、】Objective：Toexplorethechangesofrabbitnuclenspulposus(NP)cellsculturedinvltmandtheanabnlieeffectintroducedbyrhTGF—B1(mthe(：ellsMethod：RabhitNPcellsgroupedinto3groupswereculturedinvitroi；aroneweekGroupA，monolayerculture；groupB，threedimensionaleu]tureinatype1Icnnagenseaftbht；grnupC，threedimensio

5、nalcultureinthetypelIcollagenscaffoldadding10ng&drhTGF—belalMorphologicalchangeswereobservedbyinvertedmicroscopeandSEM．Geneexpressionlevelswerearia-lyzedbyhaltquantativeRT—PCRTotalcollagensynthesiswasassayedby311一prolineincorporationResult：RabbitNPcellspossessaroundmorphologywhenculturedingrou

6、pRandgroupCwhilethecellspossessapolygonalmorphologywhenculturedingroupAGeneexpressionlevelsofvpeⅡcollagen．AggrecanandtotalcollagensynthesisofgroupBincreasedby1．21．112，lllfoldsrespectively．ascomparedwithgroupA(P<005，P

7、nandtotalcollagensynttmsisofgroupCincreasedby129，132，116，1．26foldsrespectively(P<001，P<001，P<0．05．P<001respectively)ascomparedwithgroupBConclusion：GeneexpressionlevelsandtotalcollagensynthesisincreascwhenrabbitNt’cellsareculturedinthety