甲胎蛋白抑制PTEN活性导致肝癌细胞耐受ATRA诱导的凋亡的研究.pdf

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1、·8·中国实用医药2014年2月第9卷第5期ChinaPracMed，Feb2014,Vo1．9，No．5甲胎蛋白抑制PTEN活性导致肝癌细胞耐受ATRA诱导的凋亡的研究张蕾邢绍芝张婷婷赵磊磊【摘要】目的研究分析甲胎蛋白对PTEN活性产生抑制引起肝癌细胞耐受ATRA发生凋亡。方法选取2012年11月一2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者，将患者术后肝癌细胞制成标本。结果人体肝癌HepG2与Bel7402细胞均存在PTEN表达，经160pmol／L的ATRA处理24h后可加强这些细胞的PTEN的表达。Co—IP技术实验得知甲胎蛋白可与PTEN相结合，最终对ATRA产生影

2、响。结论肝癌细胞中表达的甲胎蛋白可与PTEN相结合，最终发现AFP为肝癌细胞耐受ATRA的重要因子。【关键词】甲胎蛋白；PTEN活性；肝癌细胞；ATRAInhibitedtheactivityofPTENby蛐fetalproteinCallsedre渤皿ce协柚ltramretinoicacidofhepatomacellsZHANGXINGShao-zhi,ZHANGTing-ting,et口f．DepartmentofEpidemiology,BinzhouMedicalUniversity,Binzhou256600,China【Abstract】objectlve

3、TostudyandanalyzeinhibitionofPTENactivitybyalphafetalproteinCallsedresistancetoalltransretinoicacidofhepatomacells．MethodsSelectinNovember2012toNovember2013inthehospitalmakeadiagnosisandgivetreatmentof36casesoflivercancerpatients，thepatientsofpostoperativelivercancercellspecimen．ResultsHum

4、anhepatocellularcarcinomaHepG2andBel7402cellexpressionPTEN，24，160msofmol几ATRAtreatmentcanstrengthentheceilstheexpressionofPTENasachild．Co．IPtechnologyexperimenttoldmatAFPcanbecombinedwithPTEN．ultimatelyaffectATRA．ConclusionThelivercancercellsexpressAFPCanbecombinedwithPTEN．eventuallyfoundt

5、heAFPforthemostimportantfactorsofliverCanCeTcellsresistanttoATRA．【Keywords】Alphafetalprotein；PTENactivity；LiverCanCel"cells；A]限A肝癌是人类健康最大的威胁疾病中的一种，因为受到病单克隆抗体均源自Ps公司。B—Actin单克隆抗体及鲁米诺毒性肝炎、环境等有关因素的影响，导致肝癌发病的机率逐试剂源自SC公司。兔抗人PTEN多克隆抗体由美国实验室渐升高。因为肝癌细胞会出现再生、转移，同时癌细胞对药视觉公司生产。二抗是羊抗兔多克隆抗体、辣根过氧化物物存在一定

6、的耐受，从而增加了治疗难度。因此，充分掌握酶连接的羊抗鼠。FITC标记的羊抗兔与TRITC标记的羊抗肝癌耐药因子的机制，对临床肝癌的治疗十分重要。甲胎蛋小鼠二抗由美国杰克逊IR公司生产。RNA干扰试剂盒，即白(简称AFP)是肝癌细胞合成的具有很高特异性的蛋白质癌，GFP，Neosi—RNA表达载体试剂盒由上海吉玛公司提供。之一，绝大多数肝癌患者在发病期会产生AFP基因高表达的Ly294002及ATRA由Sigma提供。pcDNA3．1载体源自广州特点，并且AFP是肝癌诊断的金标准。有资料指出，肝癌细泰盛公司。胞产生的AFP能加强肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞的双重1．2方法应用

7、Westernbloaing法对全反式维甲酸f简称作用。PTEN则是将3一磷酸肌醇(简称PIP3)水解成2一磷酸ATRA)进行分析并处理人体肝癌HepG2、Bel7402细胞24h肌醇(简称PIP2)的磷酸酶，同时可以避免3一磷酸肌醇激酶后，PTEN表达产生变化的情况J。通过免疫共沉淀(简称(简称PI3K)磷酸化蛋白激酶B(简称PKB／AKT)，导致PI3K／C0一IP)技术分析PTEN与AFP之间相互作用。应用激光共AKT信号传导被中断，可见是一种非常关键的抑癌基因。聚焦显微镜监测PTEN与AFP在细胞内的共定位