酸性染料比色法测定斜脉暗罗茎、叶和皮中总生物碱含量-论文.pdf

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1、江苏农业科学2014年第42卷第1期一263一刘冰晶，曾靖，李超，等．酸性染料比色法测定斜脉暗罗茎、叶和皮中总生物碱含量[J]．江苏农业科学，2014，42(1)：263—264酸性染料比色法测定斜脉暗罗茎、叶和皮中总生物碱含量刘冰晶，曾靖，李超，杜兵，曾发挥，曾雪亮(1．赣南医学院药学院，江西赣州341000；2．江西省脑血管药理重点实验室，江西赣州341000)摘要：以小檗碱为对照品，在pH值为4．5的醋酸一醋酸钠缓冲溶液中，以溴甲酚绿指示液为显色剂，利用分光光度法在628nm测定斜脉暗罗中总生物碱含量，结果表明，小檗碱对照品在2．0～12．0mg

2、／L范围内浓度(c)与吸光度(D)呈线性关系，回归方程为D=0．0082C+0．1671，r=0．9991；斜脉暗罗茎、叶和皮中的总生物碱含量分别为0．2671％、1．4737％和0．7908％。分光光度比色法测定总生物碱含量操作简便，结果可靠，重复性好，可用于斜脉暗罗总生物碱含量的测定。关键词：斜脉暗罗；总生物碱；紫外分光光度法；茎；叶；皮中图分类号：R284．2文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)01—0263—02斜脉暗罗(Polyalthiaplagioneura)属番荔枝科(Annonaee—匀即得20mg／L标准溶液。取小

3、檗碱对照品溶液，显色后进ae)暗罗属(Polyalthiagenus)，系我国特有种，分布于云南、广行可见一紫外全波长扫描，结果表明对照品溶液在628nm处东、广西南部及海南⋯，为海南优势种。国内外学者从暗有最大吸收峰。经多次重复，峰形一致且空白对照无干扰，故罗属20多种植物中得到了生物碱、萜类等多种类型化合选择628nm作为样品测定的波长。取标准溶液1．2、2．4、物“，从斜脉暗罗中分离得到生物碱类化合物marcanineA3．6、4．8、6．0、7．2mL分别置于20mL容量瓶中，用三氯甲烷和少量其他化合物一，但有关斜脉暗罗总生物碱含量的测稀释至1

4、0mL，加入pH值为4．5的醋酸一醋酸钠缓冲液定未见报道。本研究以小檗碱为对照品，在pH值为4．5的5．0mL和0．04％溴甲酚绿溶液2．0mL，剧烈振摇5min，静醋酸一醋酸钠缓冲溶液中，以溴甲酚绿为显色剂，在628nm置30rain；取下层液5mL，加入0．01mol／L氢氧化钠一乙醇波长下，利用分光光度法测定斜脉暗罗总生物碱含量，为保护溶液1．0mL，摇匀，于628nm处测吸光度。以小檗碱含量为和合理利用药用植物资源斜脉暗罗提供科学依据。横坐标，吸光度为纵坐标制作标准曲线。1．2．3空白溶液的制备取10mL三氯甲烷溶液于20mL1材料与方法容量瓶

5、中，加入5．0mL醋酸一醋酸钠缓冲液和0．04％溴甲1．1仪器、试剂与材料酚绿溶液2mL，剧烈摇动5min，然后静置30min；取下层液紫外可见分光光度计(尤尼柯uV一4802)；98～C一数显5mL，加入0．olmol／L氢氧化钠一乙醇溶液1．0mL摇匀，作控温电热套(天津泰斯特)；索式提取器；电子天平；三氯甲烷为空白溶液。(AR)；溴甲酚绿(AR)；小檗碱标准品(成都领航者生物)；pH1．2．4斜脉暗罗总生物碱的提取分别准确称取斜脉暗罗值为4．5的醋酸一醋酸钠缓冲液；0．01mol／L氢氧化钠溶液茎0．5g、叶0．25g和皮0．5g，用适量氨水湿润

6、，密封放置(用乙醇溶解)。30min，索式提取2h，将提取液置于碘化铋钾溶液经薄层层斜脉暗罗采自海南省昌江县霸王岭自然保护区，由海南析(TLC)至不显色为止，回收三氯甲烷，残留物放冷至室温，师范大学生命科学学院钟琼芯教授鉴定为Polyalthiaplagio—用三氯甲烷溶解并定容至20mL；取0．2mL于容量瓶中，加neura，标本现藏于江西省脑血管药理重点实验室。三氯甲烷定容至10mL，混匀作为样品液；取10mL样品液于1．2试验方法3个20mL容量瓶中，加入5．0mL醋酸一醋酸钠缓冲液和参照刘冰晶等的方法并进行改良。2mL0．04％溴甲酚绿溶液，剧

7、烈摇动5min，然后静置1．2．1试验溶液配制用0．2mol／L氢氧化钠滴加冰醋酸，30min；取下层液5mL，加0．01mol／L氢氧化钠一乙醇溶液调节pH值为4．5，即得醋酸一醋酸钠缓冲溶液；称取溴甲酚1．0mL，摇匀，于628nm处测吸光度，计算生物碱含量。试验绿40mg，加100mLpH值为4．5的醋酸一醋酸钠缓冲溶液溶重复3次。解，过滤，即得0．o4％溴甲酚绿溶液。2结果与分析1．2．2标准曲线的制作称取干燥至恒重的小檗碱对照品2mg，置于100mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至100mL，摇2．1标准曲线方程经过统计处理，得到标准曲线回归方程为

8、：D=0．0082C+0．1671，相关系数r=0．9991，线性范围为2．0—12．0mg／