酸性染料比色法测定虎舌红中总生物碱的含量

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1、酸性染料比色法测定虎舌红中总生物碱的含量【摘要】目的建立测定虎舌红总生物碱的含量测定方法。方法采用溶剂萃取酸性染料比色法测定，以去氢飞廉碱（C16H22N4O2）为对照品，溴甲酚绿为酸性染料，用氯仿萃取，检测波长418nm。结果去氢飞廉碱在0.72～14.02mg/L范围内与吸光度呈良好线性关系，回归方程为：Y=19.254X-1.6247,r=0.9995(n=5)，平均回收率为101.65%，RSD为0.75%（n=5）。结论所建立方法简便、准确、选择性强。【关键词】虎舌红总生物碱；酸性染料比色法；去氢飞廉碱　　Abstract：ObjectiveToestablisham

2、ethodforquantitativedeterminationofthetotalalkaloidsintherootofArdisiamamillata.MethodsThecontentinedbysolventextractionandaciddyecolorimetiy,ocresolgreenastheaciddye,andthe.ResultsAcanthoineRuscope-ineshog/L.Theregressionequationestablishedethodiseasy,accurateandspecific.　　KeyamillatatotalA

3、lkaloid;AcidDyeColorimetiy;AcanthoineRuscope-ine　　虎舌红Ardisiamamillata，又名红毛毡、宝鼎红、天仙红衣、毛凉伞、金丝红珠等，为紫金牛科紫金牛属。原产我国，分布于福建、广西、广东、云南、四川、贵州、江西等地。虎舌红叶片紫红色，果实鲜红色，叶果并美，是室内观叶植物的首选佳品［1］。《云南中草药选》中记载虎舌红全草可入药，有清热利湿、活血止血、去腐生肌等功效，对跌打损伤、风湿骨痛、肺痨咳嗽、疳积肝炎均有疗效［2］，生物碱是其主要活性成分［3］。本文以虎舌红中的主要成分总生物碱为指标，建立虎舌红总生物碱的含量测定方法。现

4、报道如下。　　1器材　　752C紫外-可见分光光度计(上海第三分析析仪器厂)；PHS-2型酸度计(上海雷磁仪器厂)；FA-1004电子天平(上海精密科学仪器有限公司)。　　实验所用虎舌红全草采于封开黑石顶森林保护区，经本校植物研究室鉴定为紫金牛科(Myrsinacese)、紫金牛属（Ardisia）虎舌红（A.mamillata）。去氢飞廉碱对照品（中国药品生物制品检定所）；溴甲酚绿（北京化工厂）；其它试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1供试液制备　　2.1.1供试品溶液的配制称取虎舌红粉末200g，用10倍量pH=3的75%乙醇分3次加热回流提取，3h/次，得醇取液，6

5、0℃下减压浓缩得浸膏；用2%盐酸溶解，过滤除去不溶性非碱性脂溶性杂质，用乙醚、氯仿洗涤3次除去亲脂性非生物碱类成分，然后加浓氨水调pH值为6～7，过滤除去鞣质类杂质沉淀，再用氨水调pH至10～11后，用氯仿萃取，萃取液置50ml容量瓶中，用1mol·L-1醋酸钠调至pH值为5.5，摇匀，用pH5.5醋酸-醋酸钠缓冲液稀释至刻度，即得供试品溶液。　　2.1.2对照品溶液的配制精密称取去氢飞廉碱20mg，置50ml容量瓶中，加pH5.5醋酸-醋酸钠缓冲液溶解并稀释至刻度，得对照品贮备液。精密吸取1ml贮备液置50ml容量瓶中，加上述缓冲液稀释至刻度，得对照品溶液。　　2.1.3酸性

6、染料、缓冲溶液的配制　酸性染料选择常用的溴甲酚绿或溴麝香草酚蓝，其溶液均按《中国药典》方法［4］配制。pH4.5，pH5.0，pH5.5，pH6.0醋酸-醋酸钠缓冲液均按　　2.3线性范围的考察精密吸取对照品溶液（2.0g/L）0.0，5.0，10.0，15.0，20.0，25.0，30.0，35.0，40.0，45.0，50.0μl分别置于25ml具塞试管中，分别加入pH5.5醋酸-醋酸钠缓冲液3ml，酸性染料溶液2ml，氯仿10ml，密塞，剧烈振摇2min，转移至分液漏斗中，静置2h，分取氯仿层于418nm测定吸光度。以去氢飞廉碱对照品浓度对吸光度进行线性回归，得回归方程：

7、Y=19.254X-1.6247，r=0.9995（n=5）。结果表明，去氢飞廉碱在0.72～14.02mg/L范围内呈良好的线性关系。　　2.4精密度考察精密吸取同一供试品溶液5份，每份25μl，按照2.3项下的方法进行操作，测定吸光度，计算样品含量，RSD为1.68%（n=5）。表明该方法精密度良好。　　2.5重现性考察取同一批供试样品，按2.1.1项下配制成供试品溶液，按2.3项下方法测定，得以去氢飞廉碱计的总生物碱平均含量为16.61%，RSD为2.51%。表明该方法重现性良好。