超声法提取香椿叶多糖条件优化-论文.pdf

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1、第28卷第4期安徽工程大学学报V01．28．No．42013年12月JournalofAnhuiPolytechnicUniversityDec．，2O13文章编号：1672—2477(2013)04—0001—03超声法提取香椿叶多糖条件优化徐强，黄晓东，卢健(安徽工程大学生物与化学工程学院，安徽芜湖241000)摘要：以香椿老叶为原材料，通过正交实验优化方法，探讨了超声时间、超声功率、温度对香椿叶粗多糖提取的影响．结果表明，香椿叶多糖超声提取最优工艺条件为超声时间45min、超声功率240W、温度60℃，此条件下香椿

2、老叶多糖提取率为5．49．该工艺较一般传统工艺香椿老叶粗多糖提取率有所提高．关键词：香椿叶；多糖；超声提取；正交试验中图分类号：$132文献标识码：A香椿(Toonasinensis)又名椿树、椿，楝科，香椿叶、芽具有很高的药食作用，被国外誉为“绿色保健菜”[．香椿叶含有如多糖、生物碱、皂苷、挥发油等大量生物活性物质，其提取物具有调血脂、降血糖、抗癌、体外抗氧化等生理作用]．对多糖的提取方法主要有热水浸提]、微波预处理n]、超声提取等方法．超声波本身就是能量的一种形式，形成反复的冲击波可以激活反应分子，使多糖的提取得率大

3、大提高，其主要是利用超声波的空化作用使生物活性物质加速溶解，从而增强提取效率．而对香椿老叶超声提取方法未见文献报道．本研究采用正交实验法对香椿老叶多糖进行优化，为香椿老叶资源深度开发提供理论依据．1实验材料与方法1．1材料、试剂与仪器香椿叶于1O月份采摘于连云港赣榆县沙河子园艺场，于5O℃烘干粉碎备用，葡萄糖、苯酚、浓硫酸等皆为分析纯，以蒸馏水作为提取溶剂．722可见分光光度计，上海佑科仪表仪器有限公司；KQ4OO—KDB型高功率数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司．1．2试验方法(1)多糖的测定方法．采用硫酸一苯酚

4、法，以葡萄糖作为标准品进行测定．(2)香椿老叶多糖得率的测定．以蒸馏水溶解香椿老叶粉末制得香椿老叶提取液，提取后抽滤处理，取该滤液1mL于带刻度试管中，补加蒸馏水至2mL，以2mL蒸馏水作对照．根据下式计算多糖得率：多糖提取得率()一提取液中多糖含量／香椿老叶质量×100．(3)单因素及正交试验．试验首先考察不同单因素提取条件下对香椿老叶多糖得率的影响，包括提取时间、提取温度、提取功率、料液比，再选取3个主要因素进行正交试验，以确定最优提取条件．2结果与讨论2．1绘制葡萄糖标准曲线准确称取105℃下干燥恒重葡萄糖粉末20

5、mg于500mL容量瓶，加水至刻度，摇匀作为贮备液．分别用移液管于贮备液中移取0．2mL、0．4mL、0．6mL⋯08mL、1．0mL、1．2mL、1．4mL和1．6mL，补加蒸馏水至2mL，分别加入6％苯酚溶液1mL和浓硫酸5mL，静置30rain后于490nm处测定其吸光度，并以2mL蒸馏水作对照进行空白实验．按紫外一可见分光光度法，以吸光度(A)为纵坐标，以葡萄糖质量为横坐标，绘制出标准曲线图，如收稿日期：2013—07—10作者简介：徐强(1988一)，男，江苏连云港人，硕士研究生．通讯作者：黄晓东(1963一)

6、，男，安徽芜湖人，副教授，硕导．安徽工程大学学报第28卷图1所示．得到线性回归方程：Y一0．0089x一0．0003，该方程线性关系良好(R一0．9989)，表明葡萄糖在10～70ug范围内与吸光度呈良好线性关系，可用此方程计算待测溶液中多糖含量．葡萄糖质量／ug2．2单因素试验图1葡萄糖标准曲线(1)超声时间对提取率的影响．准确称取香椿老叶粉末5g各5份，按料液比1：30，超声功率200W，温度60℃，时间取15min、30min、45rain、60rain、75rain，按1．2所述方法测定多糖含量，并进行3次平行试

7、验，结果取平均值，提取多糖结果如图2所示．结果表明，随着提取时间增加，多糖提取率逐渐增加，但在50min后多糖提取率趋于平稳，考虑到可能是由于达到一定时间后多糖已经溶出，45min时多糖最大提取率为5．13，所以选择45min为适宜的提取时间．(2)超声功率对提取率的影响．准确称取香椿老叶粉末5g各5份，按料液比1．：30，时间45min，温度6O℃，超声功率取160W、200W、240W、280W、320W，按1．2所述方法测定多糖含量，并进行3次平行试验，结果取平均值，提取多糖结果如图3所示．结果表明，开始时提取率随

8、超声功率增大而变高，在240W下提取率达到最大5．13，之后功率增大反而提取率下降，分析可能是超声波空化作用加剧，导致其他成分溶出增加的原因．因此，选取240W为适宜功率．(3)温度对提取率的影响．准确称取香椿老叶粉末5g各5份，按料液比1：3O，时间45min，功率240W，温度取30℃、4OC、50℃、6O℃、7