超声法提取香菇多糖最佳工艺优化研究

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1、万方数据2007年7月第29卷第7期中成药ChineseThditionalPatentMedicineJuly2007V01．29No．7超声法提取香菇多糖最佳工艺优化研究胡斌杰，王芳，王方林(开封大学化学工程学院，河南开封475004)关键词：香菇多糖；正交试验；超声提取中图分类号：R284．2文献标识码：B文章编号：1001-1528(2007)07一附4-02香菇(Lentinusedodes(Berk．)Sing)是侧耳科(Pleurota—ceae)的担子菌，世界名贵食用兼药用菌之一。香菇

2、子实体中除含有蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素和对人体有益的微量元素外还含有一种重要的生物活性高分子一多糖。香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等多项功能。它的作用已被世界医学生物界作了充分的研究，尤其在日本，它被广泛应用于药品和保健食品中，以它制成的制剂——香菇多糖针剂及片剂，配合放化疗，用于肿瘤患者疗效显著，由于它的特殊的免疫功能，在全世界各地被广泛应用。临床主要用于胃癌、肺癌、肠癌及癌性胸腹水等恶性肿瘤的治疗，另外对提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有较好的作用⋯。传统的香菇多糖

3、提取工艺复杂，浸提剂用量大、收率低、成本高。近年来人们开始采用超声波技术提取植物多糖，研究表明，利用超声波产生的强烈振动，高的加速度，强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速有效成分进入溶剂，从而有利于多糖的提取口1。本试验采用单因素考察和正交试验方法利用超声波对香菇多糖提取的最佳工艺进行了探讨，为香菇多糖工业化生产提供一定的理论参考。1仪器与试药1．1仪器超声波处理器(JY92—2D)，宁波超声器材厂；紫外分光光度计(722型)，天津分析仪器厂；离心机(LX．I—lI型)，上海医用分析仪器厂；恒温水浴锅。

4、1．2试药香菇由开封市食用菌栽培基地提供；苯酚、葡萄糖、无水乙醇、浓硫酸、乙醚等均为分析纯试剂。2实验方法2．1香菇多糖提取实验方法香菇经烘干后粉碎，过40目筛，先用乙醚回流脱脂2次，再用85％乙醇提取去除单糖、低聚糖，过滤。预处理后的菌粉采用超声提取。对提取的不同料液比、提取次数、超声时间、温度进行单因素探索以确定各因素水平，用正交试验优选出最佳超声提取工艺条件。2．2多糖的测定方法香菇多糖的测定采用苯酚一硫酸比色法，以葡萄糖为标准品。2．2．1标准样品溶液的配制精密称取105。C干燥至恒重的葡萄糖

5、对照品100mg置于100mL量瓶中，加水适量使溶解，定容。精密吸取上述溶液10mL定容至100mL量瓶中，即得100¨g／mL的标准品溶液。2．2．2最大吸收光波长的确定分别吸取一定量的标准葡萄糖溶液样品，置于比色皿中，加水至2mL，加1mL5％苯酚后，立即加入5mL浓硫酸并混匀，室温显色20min。同时取2mL水进行上述同样操作，作为空白对照。样品溶液分别于450～550nln处测吸光度，确定其最大吸收峰所对应的波长。根据实验测定，当吸收光波长为490n／n时，样品溶液的吸光度最大，所以测定多糖含

6、量时使用的吸收光波长应为490am。2．2．3标准曲线的绘制用移液管精密移取0．1、0．2、0．3、0．4、0．5、0．6．0．7mL葡萄糖标准品溶液。分别置于10mL比色皿中，依次加水使成为2mL。另加1．0mL的5％的苯酚，摇匀，迅速滴加浓硫酸各5mL，摇匀后放置5min，在25℃水浴中放置15min，以空白校正零点，于490nm处检测其吸光度，绘制标准曲线。得回归方程为Y=1．1879X一0．0702(r=0．9997)。3结果3．1超声提取香菇多糖单因素考察3．1．1不同料液比对香菇多糖提取的

7、影响(见图1)图1不同料液比对多糖提取含量的影响收稿日期：2006—11—15作者简介：胡斌杰(1971～)，男，讲师，主要从事生物化工工艺教学和天然产物有效成分提取，分离及应用方面研究。电话：0378-3810032。附4鬟＼删如纂精万方数据2007年7月第29卷第7期中成药ChineseTraditionalPatentMedicineJuly2007V01．29No．7由图1可知，香菇多糖提出量随料液比的增大而提高，多糖的含量在料液比1：5至1：15之间变化不大，从1：15对1：20明显增长，从

8、1：20至1：25又出现较慢增长。3．1．2超声处理时间对多糖提取的影响(见图2)由图2可知，多糖提取量随超声处理时间刚开始上升较大，至超声处理40min时达到最高点，而后，随着超声时间的延长多糖含量开始缓慢下降。基础缸絮掩图2超声处理时间对多糖提取含量的影响3．1．3不同提取温度对多糖提取的影响(见图3)由图3可知，随着提取温度的增高，多糖提取量也升高，在温度50℃达最高点，而后，随着温度的延长，多糖含量反而有所下降。摹嘲缸鞭蚺图3不同提取温度对多糖提