褪黑素诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡.pdf

《褪黑素诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、CHINESEJOURNALOFANAT0MYVo1．37No．52014解剖学杂志2014年第37卷第5期褪黑素诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡黄宇林晋。周瑞祥。林建华陈宣维．(1福建医科大学附属第一医院，2福建卫生职业技术学院，3福建医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系，福州350004)摘要目的：观察褪黑素对人骨肉瘤细胞系MG63增殖和凋亡的影响及其对细胞周期和Fas基因表达的调控。方法：体外培养MG63细胞，CCK8法检测不同浓度褪黑素对MG63细胞增殖的影响，通过Hoechst33258染色观察细胞凋亡的形态学变化，流式细胞术检测细胞凋亡及细

2、胞周期改变，实时荧光定量PCR及免疫印迹检测MG63细胞Fas基因表达情况。结果：CCK8法检测显示，褪黑素可抑制MG63细胞增殖，并具有时间和剂量依赖性；Hoechst33258染色可见凋亡小体；流式细胞术检测显示褪黑素可使凋亡的MG63细胞明显增加，并使细胞周期阻滞在G2／M期；实时荧光定量PCR及免疫印迹分析显示经褪黑素作用后MG63细胞表达Fas蛋白明显增强。结论：褪黑素对MG63细胞的增殖有抑制作用，并诱导其发生凋亡，其机制可能与细胞周期阻滞在G2／M期及上调Fas蛋白表达有关。关键词褪黑素；骨肉瘤；Fas；细胞周期；实时荧光定量PCR

3、；免疫印迹MelatonininducesapoptosisinthehumanosteosarcomaMG63cells一HuangYu，LinJin2，ZhouRuixiang。，LinJianhua，ChenXuanwei△(1．FAffiliatedHospitalofFujianMedicalUniversity，2．FujJanHealthCollege，3．DepartmentofHumanAnatomy，HistologyandEmbryology，FujianMedicalUniversity，Fuzhou350004，chin

4、a)AbstractObjective：ToinvestigatetheeffectofmelatoninonproliferationandapoptosisinthehumanosteosarcomacelllineMG63andtheregulationonthecellcycleandFasgeneexpression．Methods：MG63cellswereculturedinvitroandtreatedwithdifferentconcentrationsofmelatonin．Cellproliferationwasdetect

5、edbyCCK8．Hoechst33258wasusedtodetectthemorphologicalchangeofapoptoticcells．MG63cellswereobservedbyflowcytometryforapoptosisandcellcycle．TheexpressionofFaswasobservedbyrealtimefluorescencequantitivePCRandWesternblotting．TheapoptoticbodywasobservedbyHoechst33258dyeing．Results：T

6、heproliferationofMG63cellswasinhibitedaftertreatment，whichexhibitedinadoseandtimedependentmanner．Comparedwiththenegativecontrolgroup，theapoptosisrateofMG63cellswasincreasedandthecellcyclewasarrestedattheG2／Mphase．Ontheotherside，theFasproteinexpressionwasincreasedsignificantly

7、．Conclusion：MelatonincaninhibittheproliferationofMG63ceilsbyinducingitsapoptosis．ThemechanismmaybearrestingthecellcycleattheG2／Mphaseandup-regulatingtheexpressionofFasprotein．Keywordsmelatonin；osteosarcoma；Fas；cellcycle；rea1timePCR；Westernblotting骨肉瘤是起源于间叶组织的恶性肿瘤，青春期好发，报道。本研究

8、探讨褪黑素对人骨肉瘤细胞MG63增殖和病因不明，对放、化疗等传统治疗方法敏感性低，5年生凋亡的影响，并检测其对细胞周期及凋亡相关基因Fa