rassf1a基因转染对骨肉瘤细胞株mg63细胞增殖、凋亡的作用研究

《rassf1a基因转染对骨肉瘤细胞株mg63细胞增殖、凋亡的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号UDCR738．1610硕士学位论文学校代码』533RASSFlA基因转染对骨肉瘤细胞株MG63细胞增殖、凋亡的作用研究ResearchoncellproliferationandapoptosisofosteosarcomacellsMG63transfectedbyRASSFlAgene作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：蔡智临床医学外科学湘雅三医院臧晓方副教授论文答辩日期丝L≥：j、．“答辩委员会主席中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了

2、论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服

3、务。作者签名导师签名＼上叮，—∥冱日期：逊年j^月五RASSFlA基因转染对骨肉瘤细胞株MG63细胞增殖、凋亡的作用研究摘要目的：RASSFlA是一种新型候选抑癌基因，其抑癌作用见于人类多数肿瘤中。本研究探讨抑癌候选基因RASSFlA转染对骨肉瘤细胞株MG一63细胞增殖、凋亡的作用，进一步证实该基因的抑癌作用及作用机制，为新型基因替代疗法运用于临床提供实验基础与理论依据。方法：1．构建pCDNA3．1(+)．RASSFlA并鉴定，将空质粒载体及含RASSFlA基因的重组载体运用“脂质体转染法”转染到骨肉瘤MG．63细胞株中。2．western．blot检测

4、基因转染组、空质粒组及空细胞组三者中RASSFlA蛋白的表达水平。3．在基因转染后的24h，48h，72h，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测基因转染组、空质粒组及空细胞组三者细胞的增殖情况。4．在基因转染后的24h，48h，72h，原位末端标记法(TUNZL)检测基因转染组、空质粒组及空细胞组三者细胞的凋亡情况。结果：1．RASSFlA基因可在骨肉瘤细胞株MG63中成功转染，pCDNA3．1(+)．RASSFlA在骨肉瘤细胞MG63中构建成功。2．导入RASSFlA基因后，骨肉瘤细胞株MG63中出现RASSFlA蛋白表达现象，而对照组未出现蛋白表达，证

5、实骨肉瘤细胞中存在RASSFlA的表达缺失。3．RASSFlA基因转染后肿瘤细胞株生长增殖过程明显受到抑制，细胞增殖生长速度明显降低，与空质粒组及空细胞组相比有统计学意义(p<0．05)。4．RASSFlA基因转染后肿瘤细胞株出现凋亡细胞增加，细胞凋亡指数明显高于空质粒与空细胞组，差异具有显著统计学意义(p

6、。关键词：MG63；基因转染；RASSFlA；细胞增殖与凋亡分类号：R738．1IliResearchoncellproliferationandapoptosisofosteosarcomacellsMG63transfectedbyRASSFlAgeneObjective：RASSF1Awasanewcandidatetumorsuppressorgenes．whichcouldplayaroleoftumorsuppressorinmostofthetumors．ThissubiectwastofurtherdiscusseRASSF1Agenetr

7、ansplantationforcellproliferationandapoptosisofosteosarcomacellsMG63．Tofurtherconfirmtheroleofsuppressorandmechanisminthetumor．Itcouldprovidebasisofexperimentalandtheoreticalforthenewgenereplacementtherapyusingintheclinicfield．Materialsandmethods：1．BulidpCDNA3．1(+)一RASSF1Aandident

8、ifyit，TheplasmidsinclindingpCDNA3