高剂量法诱导胃癌铂类耐药细胞株的建立及其生物学特性-论文.pdf

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1、第52卷第4期山东大学学报(医学版)2014年4月VO1．52NO．4JOURNALOFSHANDONGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES)Apr．2014文章编号：1671—7554(2014)04—0049—04DOI：10．604o／j．issn．1671-7554．0．2013．556高剂量法诱导胃癌铂类耐药细胞株的建立及其生物学特性延冰，刘国勤，姜永胜，沈海玉。，孙少川(1．山东大学医学院，山东济南250012；2．山东大学附属济南市中心医院胃肠外科，山东济南250013)摘要：目的探讨利用高剂量(0

2、．8~g／mL)顺铂(cDDP)诱导胃癌顺铂耐药细胞株的建立及其生物学特性。方法采用大剂量冲击法诱导人胃癌耐顺铂细胞株BGC823／cDDP建立。观察BGC823／cDDP细胞形态，CCK一8法检测细胞的耐药指数，CCK一8绘制生长曲线，流式细胞仪检测细胞的生长周期，Transwell法检测细胞侵袭能力的变化，免疫发光法测定细胞培养液中肿瘤标志物CEA、CA．199含量。结果采用大剂量cDDP冲击方法诱导后，BGC823／cDDP细胞较BGC823细胞体积略增大，细胞核增大，形状不规则，并可见散在的多核巨细胞，其对顺铂的耐药指

3、数为4．54，耐药细胞系的倍增时间较正常BGC823细胞延长，BGC823／cDDP细胞G。期细胞增多，而s、G期细胞减少，耐药细胞株侵袭力增强(P<0．05)，耐药细胞培养液中肿瘤标志物CEA、CA一199含量与正常胃癌细胞无明显差别。结论通过大剂量cDDP冲击方法建立了顺铂耐药胃癌细胞株BGC823／cDDP，耐药细胞与正常细胞的生物学特性不同。关键词：胃癌；耐药细胞；顺铂；生物学特性中图分类号：R735．2文献标志码：AEstablishmentofcisplatin—resistantgastriccancercell

4、lineandthebiologicalcharacteristicsYANBing，LIUGuoqin，JIANGYongsheng，SHENHaiyu，SUNShaochuan(1．SchoolofMedicine，ShandongUniversity，Jinan250012，Shandong，China；2．DepartmentofGastrointestinalSurgery，JinanCentralHospitalAfiliatedtoShandongUniversity，Jinan250013，Shandong，C

5、hina)Abstract：0bjectiveToexplorethedrug—resistantgastriccancercelllineinducedbyhigh—dosecDDPanditsbiologi—calcharacteristics．MethodsAdrug．resistantgastriccancercelllineBGC823／cDDPwasestabfishedbyhigh—dosecD—DP．Thechangesofbiologicalcharacteristicsofthecelllineswereo

6、bservedusinglightmicroscopy．Tleresistancein—dexwasdeterminedbyCCK一8assay．Thecellgrowthc1．nwewasdrawnbyCCK一8assay．Thecellcycleofdrug—resist—antcellswastestedbyflowcytometry．ThecellinvasionabilitywasobservedbyTranswellassay．ThedensitiesofCEAandCA一199inthecellcultureme

7、diumwereevaluatedbyimmuneluminescence．ResultsComparedwithBGC823cells，theBGC823／cDDPcellsturnedtobeslightlybiggerandirregularinshape，andsomegiantcellscouldbeseen．nleproliferationrateofBGC823／cDDPcellprolonged．withtheresistanceindexbeing4．54．Thepopulationdoubling—time

8、prolonged．ThecellnumbersofG，phaseincreasedwhiledecreasedinSandG2phaseinBGC823／cDDPcel1．TheinvasionabilitywasstrongerinBGC823／cDDPcell(P<0．