膀胱癌T24顺铂耐药细胞系的建立及生物学特性.pdf

《膀胱癌T24顺铂耐药细胞系的建立及生物学特性.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、338Labeledlmmunoassays＆ClinMed，Apr．2015，Vo1．22，No．4·方法研究·膀胱癌T24顺铂耐药细胞系的建立及生物学特性赵熳，张曼，马萍(1．徐州医学院医学技术学院，江苏徐州221004；2．首都医科大学附属北京世纪坛医院，北京100038)摘要：目的采用浓度梯度法诱导建立人膀胱癌顺铂耐药细胞系(T24／DDP)，并观察其生物学特性。方法利用人膀胱癌细胞株T24，采用顺铂(DDP)作为诱导剂在体外建立人膀胱癌顺铂耐药细胞模型T24／DDP(0．6mL)。通过倒置相差显微镜下观察

2、T24、T24／DDP细胞形态，MTF法检测细胞多药耐药性，生长曲线检测细胞的增殖能力，流式细胞术测细胞的周期，qRT-PCR检测耐药基因MRP(multidrugresistance—associatedprotein)的表达。结果经过顺铂14个月的诱导，成功建立了T24／DDP。倒置相差显微镜下观察与T24细胞相比较，T24／DDP排列不规则，形态出现多形性，出现巨细胞；与T24相比较，T24／DDP对顺铂、阿霉素、长春新碱、甲氨蝶呤均产生不同程度的交叉耐药，比T24细胞倍增时间明显延长，细胞周期中G1期细胞增

3、多，G2、S期细胞减少。qRT—PCR结果显示，耐药细胞MRP基因的表达明显高于亲本细胞。结论人膀胱癌耐顺铂细胞株T24／DDP具有多药耐药性，可以作为研究膀胱癌细胞多药耐药的良好实验模型。关键词：人膀胱癌细胞；顺铂；多药耐药EstablishmentofCisplatin-multidrugResistanceCellLineofHumanBladderCancerT24andItsBiologicalCharacteristicsZHA0Man。ZHANGManI，．MAPing(1．CollegeofMedi

4、calTechnique，XuzhouMedicalCollege，Xuzhou221004，China；2．BeijingShijitanHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100038，China)Abstract：ObjectiveToestablishacisplatinresistantbladdercancercelllineandtoanalysisitsbiologicalcharacteristics．MethodsDrugconcentrationg

5、radientincreasingmethodwasadoptedtoinducedrugresistance．T24andT24／DDPwereobservedunderphasecontrastmicroscope．MultidrugresistanceOfthetwocelllineswasdeterminedbyMT-F．Cellproliferationwasevaluatedaccordingtothegrowthcurve．Flowcytometrywasperformedtodeterminecyc

6、lesofthetwocelllines．Theexpressionofmultidrugresistancerelatedgenemuhidrugresistance—associatedprotein(MRP)wasdetectedbyqRT—PCR．ResultsAfter14months，cisplatin—resistanthumanbladdercancercelllineT24／DDPwassuccessfullyestablishedfromitsparentalcelllineT24．Twokin

7、dsofcellsweresignificantlydifferentfromeachotherbyamicroscope．T24／DDPcellwas9．51timesmoreresistanttoDDPthanT24．T24／DDPcelllineexhibitedthecharacteristicsofcross—resistancetocisplatin，adriamycin，methotrexate，vincristine．ThecelldoublingtimeofT24／DDPwaslongerthan

8、parentalcelllineT24．ComparedwithT24，theproportionofG2andSphasecellsinT24／DDPdecreasedsignificantly，whilethatofG1phasecellsincreasedsignificantly．Theexpressionofdrug-resistancerelat