人肺腺癌anip fcddp耐药细胞系的建立及生物学特性分析

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1、哈尔滨医科大学硕士学位论文人肺腺癌Anip973/CDDP耐药细胞系的建立及生物学特性分析姓名：张长海申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：陈公琰20070501人肺腺癌Anip973/CDDP耐药细胞系的建立及生物学特性分析中文摘要目的建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/CDDP并检测其生物学特性方法本研究应用人肺腺癌细胞系Anip973采用顺铂逐步增加剂量法诱导建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/CDDP细胞计数法绘制生长曲线计算其倍增时间光学显微镜和扫描电镜观察其形态流式细

2、胞仪分析其细胞周期MTT法测定细胞IC50计算其耐药指数结果本研究经过24个月建立了人肺腺癌耐药细胞系Anip973/CDDP通过Anip973/CDDP生物学特性分析发现(1)光镜及电子显微镜观察Anip973/CDDP细胞与Anip973细胞比较细胞形态不规则呈长伪足的多角形及体积增大胞质内细胞器比较发达线粒体丰富(2)与亲代细胞相比Anip973/CDDP细胞生长曲线的倍增时间无明显差异(3)细胞周期分析发现耐药细胞系Anip973/CDDP的G0-G1期细胞明显减少为52.

3、18S期细胞明显增多为28.60%而亲代细胞系Anip973的上述各周期的百分比分别为66.11%和16.37(p<0.05)两种细胞系G2-M期细胞无明显变化提示耐药细胞的DNA合成增加经MTT法测定Anip973/CDDP细胞比较亲代细胞的CDDP半数致死浓度IC50增大至27.26倍该耐药细胞系同时对伊立替康吉西他滨达卡巴嗪足叶乙甙诺维本表阿霉素药物也产生了交叉耐药耐药倍数分别为20.3319.967.105.345.274.38而对异环磷酰胺氟尿嘧啶

4、相对敏感耐药倍数分别为1.251.09均P0.05结论Ainp973/CDDP是可靠的人肺腺癌耐药细胞系它的建立为进一步探讨顺铂致人NSCLCMDR的发生机制奠定了基础关键词肺腺癌Anip973/CDDP细胞系顺铂多药耐药2哈尔滨医科大学硕士学位论文EstablishmentofaHumanLungAdenocarcinomaDrug-resistanceCellLineAnip973/CDDPandanalysisofitsbiologicalpropertiesAbstrac

5、tObjectiveToestablishahumanlungadenocarcinomamultidrug-resistantcelllineAnip973/CDDPandtostudyitsbiologiccharacteristics.MethodsThehumanlungadenocarcinomamultidrug-resistantcellline(A973/CDDP)wasestablishedbyinducinghumanlungadenocarcinomacelllineAni

6、p973withstep-wiseincreasingconcentrationsofcisplatin,whichusedtobethefirst-linechemotherapeuticdrugforlungcacer.Thecellgrowthcurveandthedoublingtimeweredeterminedbycounting.Changesincellularmorphologyandultrastructurewereobservedunderinverted-microsc

7、opeandscanningelectronmicroscoperespectively.Thecellcyclesweredeterminedbyflowcytometry.ThechemosensitivitiesofAnip973/CDDPandAnip973tocisplatin,irinotecan,gemcitabine,dacarbazine,etoposide,navelbine,pharmorubicin,isofosfamideand5-fluorouracilweretes

8、tedandIC50measuredbyMTT.ResultsThehumanlungadenocarcinomamultidrug-resistantcelllineAnip973/CDDPwasestablishedsuccessfullyfor24months.Itsbiologiccharacteristicswere:(1)ThecellmorphousofA973/CDDPcellsweremoreirregularthanA973cells,andtherewassignifica