瘦素促进低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞增殖及HIF-1α、NF-κB表达.pdf

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1、32细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2015，31(1·论著·文章编号：1007—8738(2015)01—0032—04瘦素促进低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞增殖及HIF-la、NF-KB表达石瑞瑞，陈显锋，朱洁晨，陈琳，朱述阳(徐州医学院附属医院呼吸内科，江苏徐州221000；大屯煤电集团责任(有限)公司中心医院内科，江苏徐州221611)[摘要]目的研究瘦素对低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖及缺氧诱导因子1ot(HIF—la)、核因子一KB(NF—KB)表达的影响。

2、方法分常氧、低氧2种状态体外培养大鼠ASMC，按随机数字表法将低氧组细胞分为低氧组、5Og／L瘦素联合低氧组(L50组)、100L瘦素联合低氧组(LIO0组)、200g／L瘦素联合低氧组(I200组)、200g／L瘦素联合低氧和瘦素受体抗体组(0b—R抗体组)。各组均孵育24h，CCK一8法检测细胞增殖率，反转录PCR检测HIF—la、NF—KB的mRNA的表达，Westernblot法检测HIF．1d、NF—KB的蛋白表达。结果与常氧组相比，各低氧组细胞增殖活性明显增强；与低氧组相比，L50、LIO0、I20

3、0组细胞增殖活性增强，并与浓度呈正相关(r=0．992)；与L50、L100、L200组相比，ob—R抗体组细胞增殖明显降低。与常氧组相比，各低氧组HIF—l仅、NF-KB的mRNA及蛋白表达增加；与低氧组相比，L50、L100、L200组HIF一1、NF—KB的mRNA及蛋白表达增加，并与浓度呈正相关；与L50、L100、L2oo组相比，ob—R抗体组HIF-l仅、NF—KB的mRNA及蛋白表达降低。结论瘦素能促进低氧状态下ASMC增殖，并且能够促进HIF—la、NF-KB的表达。[关键词]瘦素；气道平滑肌细

4、胞；细胞生长与细胞分裂；缺氧诱导因子一1；核因子一．cB[中图分类号]R392-33，R562．25，Q253[文献标志码]ALeptinpromotestheproliferationofairwaysmoothmusclecellsandtheexpressionsofHⅢ·1andNF-KBofhypoxicratsSHIRuirui。，CHENXianfeng，ZHUJiechen，CHENLin，ZHUShuyangDepartmentofRespiratoryMedicine，AfiliatedHo

5、spital，XuzhouMedicalCollege，Xuzhou221000；DepartmentofMedicine，CentralHospital，DatunCoal-Electricity(Group)CO．，LTD，Xuzhou221611，ChinalAbstractJ0bjectiveToinvestigatetheefectofleptinontheproliferationofairwaysmoothmusclecells(ASMCs)andtheexpressionsofhypoxia-i

6、nduciblefactor·lcx(HIF—la)andnuclearfactor-kappaB(NF-KB)ofhypoxicrats．MethodsTheratASMCswereculturedundernormoxicandhypoxicstates．Thehypoxiccelsweredividedintohypoxiagroup，leptin50pg／'Lhypoxiagroup(1_50group)，leptin100iJg,"Lhypoxiagroup(LIO0group)，leptin200．

7、oj'Lhypoxiagroup(L200group)，leptin200．g／Landleptinreceptorantibodyhypoxiagroup(ob-Rantibodygroup)byrandomnumbertable．Allthegroupsareculturedfor24hours．ThentheCCK-8methodwasusedtoassaycelproliferationrate，andWesternblottingandreal-timeRT-PCRtomeasuretheexpres

8、sionsofHIF·1o【andNF-KBatproteinandmRNAlevels．ResultsComparedwiththenormoxicgroup，eachhypoxiagrouphadsignificantlyincreasedcellproliferation．Comparedwiththehypoxiagroup，celproliferationratewassig