巢蛋白在低氧大鼠肺组织及肺动脉平滑肌细胞的表达及意义.pdf

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1、新医学2014年6月第45卷第6期385基础研究论著巢蛋白在低氧大鼠肺组织及肺动脉平滑肌细胞的表达及意义何苏苏冯加喜林云林玲王良兴【摘要】目的研究不同间期低氧大鼠肺组织及低氧培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)中巢蛋白的表达变化。方法24只雄性sD大鼠随机分为正常对照组(N组)，低氧2周组(H2w组)，低氧4周组(H4w组)。测定大鼠肺动脉平均压(mPAP)、颈动脉平均压(mCAP)、右心室／(左心室+室间隔)质量比[R、(LV+s)]、肺动脉相对中膜厚度(PAMT)；免疫组织化学染色测定肺动脉巢蛋白含量。分别采用逆转录PCR和蛋白印迹法检测各组大鼠肺组

2、织巢蛋白的mRNA及蛋白含量。蛋白印迹法检测常氧和缺氧培养的PASMC中巢蛋白的蛋白含量。结果1-12w组、H4w组mPAP、RV／(LV+S)、PAMT、肺动脉巢蛋白的蛋白含量、肺组织匀浆巢蛋白mRNA及蛋白含量均显著高于N组(P<0．01)，且随着低氧时间的延长，逐渐增加；肺动脉平滑肌细胞中的巢蛋白的蛋白含量，随着低氧培养的时间的增加而逐渐增高(P均<0．05)。结论低氧时巢蛋白在大鼠肺组织及肺动脉平滑肌细胞中的表达增加，后者可能在肺血管重构中起着重要作用。【关键词】巢蛋白；肺动脉平滑肌细胞；低氧Significanceofnestinexpress

3、ioninlungtissuesandpulmonaryarterysmoothmusclecellsofratsunderhypoxicconditionHESu—SU，FENGJia—xi，LINYun，LINLin，WANGLiang—几DepartmentofRespira·toryMedicine，TahhouHospital，Linhai317000，ChinaCorrespondingauthor，WANGLiang—xing，E—mail：38805@163．corn【Abstract】ObjectiveTostudytheexpress

4、ionofnestininlungtissuesandpulmonaryarterysmoothmusclecellsofratstreatedbydifferentperiodsofhypoxia．MethodsTwenty-fourmaleSprague—Dawleyratswererandomlydividedintothreegroups：normal—group(N)，hypoxic2-weekgroup(H2w)，hypoxie4-weekgroup(H4w)．Themeanpulmonaryarterialpressure(mPAP)，me

5、ancarotidarterialpressure(mCAP)，weightratiooffightventricle(RV)toleftventricleplusseptum(LV+S)[RV／(LV+S)]andthemediumthicknessofpulmonaryartery(PAMT)weredetected．Nestinproteinexpressioninlungarterywasdetectedbyimmunohistochemistry．RT—PCRandWesternblottingwereusedtoexaminethemRNAl

6、evelandproteinlevelofnestininpulmonarytissues．WesternblottingwasalsousedtodetectthenestinproteininPASMCs，whichwereculturedundernormoxiaorhypoxia．ResultsComparedwithNgroup，themPAP、RV／(LV+S)、PAMTnestinproteinexpressioninlungartery、mRNAandproteinofnestininpulmonarytissueswereallsig-

7、nificantlyhigherinbothH2WgroupandH4Wgroup(P<0．01)，andtheyweregraduallyincreasedwiththeextensionofhypoxiatime．NestinproteinexpressioninPASMCs，withtheincreasedtimeofhypoxia，wasgrad—uallyup-regulated(allP<0．05)．ConclusionLungtissuesandpulmonaryraterysmoothmusclecellsex—pressedmorene

8、stininhypoxicenvironment，whichmayplayani