神经干细胞定向分化为多巴胺能神经元过程中Mash1及Hes1基因的表达.pdf

《神经干细胞定向分化为多巴胺能神经元过程中Mash1及Hes1基因的表达.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、解剖学研究2015年第37卷第3期AnatRes，2015．V01．37．N0．3167·论著·神经干细胞定向分化为多巴胺能神经元过程中Mashl及Hesl基因的表达张君度，龙大宏，陈艳，刘菲菲，龙静怡(广州医科大学人体解剖学教研室，广东广州510182)【摘要】目的建立神经干细胞(NSCs)分化为多巴胺能神经元的体外模型，并进一步研究此分化过程中Mashl及Hesl基因的表达变化。方法无菌条件下取孕14—16d胎鼠端脑进行NSCs体外培养。将NSCs进行Nestin免疫荧光检测，对照组和实验组(GDNF+IL．1et联合组)诱导2周后进行B—tubulinⅢ和TH免疫荧

2、光染色，计算各组阳性细胞率，荧光定量PCR技术检测P4代NSCs分化1周和2周时Mash1及Hesl基因的表达变化。结果免疫荧光检测结果显示，NSCs的Nestin阳性细胞率为(93．04+3．55)％，诱导分化2周后对照组、实验组p．tubulin111阳性细胞率分别为(12．65+1．58)％和(33．95~2．97)％，两组间比较差异存在统计学意义(P<0．05)。对照组、实验组TH阳性细胞率分别为(1．46~0．41)％、(15．51~1．94)％，差异存在统计学意义(P<0．05)。荧光定量PCR结果显示，NSCs诱导分化后，Mashl基因表达较未分化状态时升高

3、，各组间比较差异存在统计学意义，实验组高于对照组(P<0．05)，分化2周高于1周(P<0．01)；Hesl基因于分化后表达降低，对照组与对实验组之间以及分化1周与2周之间比较差异没有统计学意义(P>0．05)。结论GDNF和IL．1联合作用能够诱导NSCs定向分化为多巴胺能神经元；Mashl与Hes1基因可能参与NSCs分化为多巴胺能神经元的过程。【关键词】神经干细胞；分化；多巴胺能神经元；Mashl；HeslTheexpressionofMashlandHeslduringinduceneuralstemcellsdiferentiatingintodopaminer

4、gicneuronsZHANGJun—du，LONGDa-hong，CHENYon，LIUFei-fei．LONGJing-yi，DepartmentofAnatomyofGuangzhouMedwalUniversity，Guangzhou510182，ChinaCorrespondingauthor：LONGDa-hong，Email：2856478507@qq．com【Abstract】ObjectiveTobuildtheinvitromodeldofNSCsdiferentiateintodopaminegicneurons，andfurtherstudythe

5、expressionofMash1andHeslinthisprocess．MethodsSeparatedthetelencephalonofratembryosinsterileconditionandcul—turedinvitro，takeNSCsstainedbyNestinimmunofluorescenceassay，dividedintocon=groupandexp-group(GDNF+IL-let)andinducedintodopaminegicneurons，after2weeksstainedbyp-tubulinⅢandTH，andcount

6、edtherateofpositivecellsofeachgroup．q-PCRcheckedtheexpressionofMashlandHeslinNSCsandduringdiferentiatedintodopaminegicneurons．ResultsIFshowedthattherateofNestinpositivecellswas(93．04~3．55)％，Therewerenostatisticaldiferencebetweenthetwocomparison(P>0．05)．Afterdiferamiated2weeks，therateof13-

7、tubulinⅢpositivecellswere：I)4，con—group[(12．65~1．58)％]，exp—group[(33．95~2．97)％]，respectively，Therewerestatisticaldiferencebetweenthetwocomparison(P<0．05)；therateofTHpositivecellwere：P4,con—group[(10-41)％]，exp—group[(15．51~1．94)％]，Therewerestatisticaldiferencebetween