沙利度胺对肺泡上皮细胞上皮-间质转分化的作用.pdf

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1、临床肺科杂志2015年5月第20卷第5期901沙利度胺对肺泡上皮细胞上皮一间质转分化的作用陈海华周贤龙杨炯【摘要】目的探讨沙利度胺对A549上皮一问质转分化的作用,阐明其抗肺纤维化的机理。方法A549细胞分为3组,A:对照组;B:TGF-B1+DMSO组;C:TGF—Bl+沙利度胺组。通过免疫印迹法检测A549细胞磷酸化p38MAPK和JNK的蛋白,以及间质表型蛋白和上皮表型蛋白的表达;实时荧光定量PCR方法检测A549细胞p38MAPK和JNKmRNA的表达。结果沙利度胺显著抑制(P<0.05)TGF一131诱导的A54

2、9细胞间质表型蛋白表达增加,可阻止(P<0.05)A549细胞上皮表型蛋白表达的减少,显著减少活性MAPK蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论沙利度胺可能通过p38MAPK和JNK信号通道,从而抑制肺泡上皮细胞的上皮.间质转分化过程而发挥抗纤维化作用。【关键词】沙利度胺;肺泡上皮细胞;上皮一间质转分化Efectofthalidomideonepithelial—mesenchymaltransitionofalveolarepithelialcellsCHENHai—hua,ZHOUXian-long,YANGJio

3、ngEmergencyDepartment,ZhongnanHospitalofWuhanUniveni@,Wuhan,Hubei430071,China【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofth~idomideonthep38MAPKandJNKexpressionduringEMTandthepossiblemechanismofidiopathicpulmonaryfibrosis(IPF),inordertofindanewtreatmenttargetofIPF.Metho

4、dsA549cellswererandomlydividedintothreegroups:thecontrolgroup,thegroupB(TGF-B1+DM—so),andthegroupC(TGF-B1+thalidomide)(101~g/m1).Cellsandmediawerecollectedforphospho—JNKandphospho-p38MAPK.ProteinexpressionwasdetectedbyWestern—blot,andp38MAPKandJNKmRNAweredetec—ted

5、byquantitativereal—timeRT-PCR.ResultsThalidomidecouldsignificantlymitigatetheinhibitionoftheexpres—sionofAECmarkers.Inaddition,thalidomidealsoinducedtheexpressionofmesenchymalmarkers.Furthermore,thephosphorylationandmRNAofp38MAPKandJNKweresignificantlylowerinthegr

6、oupC(TGF-81+thalido—mide)thanthatinthegroupB(TGF-81+DMSO)(P<0.05).ConclusionThalidomidecouldinhibittheEMTofA549cellsviainterferingtheactivationofMAPKs.【Keywords】thalidomide;zlveolarepithelialcells;epithelial-mesenchymaltransition特发性肺纤维化(IPF)一度认为是一种慢性炎化抑制作用。Choe报道沙

7、利度胺可抑制TGF一131症疾病,但目前认为是激活的肺泡上皮细胞异常修诱导的肺成纤维化细胞向成肌纤维细胞的EMT,有复的结果,肺泡上皮细胞通过上皮一间质转化(Epi-报道沙利度胺可抑制IL一1诱导的结肠腺癌细胞p38thelialtomesenchymaltransition,EMT)在肺纤维化MAPK的活性。据此我们推想沙利度胺可能通过影的发病中起重要作用¨,在这过程中p38MAPK和响MAPK通道,抑制TGF一131诱导的肺泡上皮细胞JNK信号通道发挥重要作用J。EMT而实现抗肺纤维化作用。本研究通过体外给沙利度胺(又

8、名反应停)曾作为镇静剂治疗妊予沙利度胺,观察其对TGF一131诱导的肺泡上皮细娠晨吐,由于导致“海豹胎”的出生而撤出市场。近胞EMT的影响,及此过程中p38MAPK和JNK信号来发现沙利度胺具有免疫调节、抗炎症反应、抗血管通路的变化,从而进一步阐明沙利度胺的作用机理,生成作用,2006年美国FDA批准与

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