cbiq对肺泡上皮细胞氧化损伤的保护作用

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1、CBIQ对肺泡上皮细胞氧化损伤的保护作用作者：黄颖，张丙芳，招明高，王晓明，黄晨【摘要】目的：研究CBIQ对肺泡上皮细胞株A549氧化损伤的保护作用.方法：应用MTT法检测不同浓度CBIQ对正常及过氧化氢（H2O2）损伤的肺泡上皮细胞株A549的保护作用；DNALadder检测细胞凋亡；相差显微镜观察Hoechst染色后细胞凋亡形态的变化.结果：H2O2损伤后的A549细胞经不同浓度CBIQ处理后，细胞死亡数明显减少.浓度为1×10-2，1×10-3mmol/L的CBIQ组平均细胞存活率分别为(

2、76.1±0.8)%，(71.3±1.0)%，较损伤组(46.3±0.9)%明显增高(P<0.01)；终浓度为100μmol/LH2O2及10μmol/LCBIQ共同干预A549细胞4h后，可检测到凋亡标志性的DNA梯形带；实验组细胞凋亡率较对照组明显下降(P<0.05).结论：在一定浓度范围内，CBIQ对氧化损伤的A549细胞生长有浓度依赖性的保护作用，并可抑制氧化损伤的A549细胞发生凋亡.【关键词】CBIQ；急性病；肺/损伤；肺泡；上皮细胞　　【Abstract】AIM:Toe

3、xploretheprotectiveroleof4Chlorobenzo［F］isoquinoline(CBIQ)inoxidativelydamagedhumanlungepithelialcelllineA549.METHODS:AfterculturedalA549cellsandtheoxidativelydamagedcellsorphologicalchangeicroscope.RESULTS:AfterA549cellsonstrated.Thecellviabilityr

4、ateofthegroupby1×10-2and1×10-3mmol/LCBIQarkedlythantherateoftheinjurygroup(46.3±0.9)%(P<0.01).Fourhoursafterexposureto100μmol／LH2O2and10μmol/LCBIQ,A549cellsundertooktheapoptosisdisplayedbytheDNALadder.Thepercentageofcellapoptosisentalgroupthaninco

5、ntrolgroup(P<0.05).CONCLUSION:Inacertainconcentrationrange,CBIQcandosedependentlyprotecthumanlungepithelialcellsfromoxidativelydamage.Theactivatorofcysticfibrosistransmembraneconductanceregulator(CFTR)caninhibittheapoptosisofoxidativelydamagedA54

6、9cells.　　【Keyonaryalveoli;epithelialcells　　0引言　　急性肺损伤(acutelunginjury，ALI)是急性呼吸衰竭的重要病因之一.氧化应激时产生的大量氧自由基和H2O2作用于肺部时可引起肺泡上皮细胞活性降低，甚至产生ALI.肺泡上皮细胞Na+，Cl-异常跨膜转运在肺水肿形成中起重要作用［1］.囊性纤维跨膜电导调节因子(CFTR)是肺泡上皮细胞中一种氯通道蛋白，CFTR异常可降低其对Na+通道的抑制作用，致Na+重吸收增加，加上Cl-分泌减少，易导致

7、肺组织水肿.CBIQ是一种CFTR氯通道特异性开放剂［2-3］，能促进CFTR氯通道开放，使Na+向细胞内流动增加，提高肺泡的液体清除能力.我们采用A549细胞作为肺泡上皮细胞模型，观察CBIQ对氧化应激引起A549细胞损伤的保护作用，探讨CFTR氯通道及CBIQ在ALI发生发展中的作用.　　1材料和方法　　1．1材料　　人肺泡上皮细胞模型A549细胞由第四军医大学生物化学与分子生物学教研室惠赠.CBIQ（Sigma公司）；噻唑蓝(MTT)（Sigma公司）；DNALadder试剂盒、荧光染料H

8、oechst33258（上海碧云天公司）；新生牛血清(杭州四季青)1640培养液(Gibco公司).　　1．2方法　　1．2．1噻唑蓝(MTT)比色实验测定细胞存活率用含100mL/L热灭活新生牛血清的1640培养基培养A549细胞，置37℃，50mL/LCO2及充分饱和湿度的培养箱内，隔日换培养液，直至细胞铺满瓶底的70%～80%，用胰蛋白酶消化并传代，选对数生长期A549细胞以2×103个/孔接种于2块96孔培养板，细胞贴壁培养24h后开始干预.第1块板分2组.对照组：只加培养液；实验组：分