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1、脂多糖对肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用论文【关键词】脂多糖类；肺表面活性剂；急性病,肺/损伤【Abstract】AIM:Tostudytheinjuringeffectoflipopolysaccharide(LPS)onalveolartypeⅡcells(ATⅡ)inacutelunginjury(ALI).METHODS:Sixteenratsizedinto2groups:controlgroupandLPSgroup.Controlgroupaleicdialdehyde(MDA)contentsintheBALFeasured;theactivitiesoflactatedehydro
2、genase(LDH)andalkalinephosphatase(AKP)inBALFicroscope.RESULTS:paredonaryedemainLPSgroupbythemicroscopy;TPLcouldbedecreased［(432±45)vs(342±59)μg/kg］andsurfacetensionbeincreased［(19.8±2.6)vs(23.3±2.9)mN/m］byLPS(P0.05);LPScouldincreasesignificantlytheactivityofAKP［(100±80)vs(360±100)nkat/L］(P0.05).CONC
3、LUSION:LPScaninjuretheATⅡandsuppressthesecretionofpulmonarysurfactantsinacutelunginjury.【Keyonarysurfactants;acutelung/injuries【摘要】目的：研究急性肺损伤时脂多糖(LPS)对肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)的损伤作用.方法：将16只SD大鼠随机等分为生理盐水对照组、LPS模型组.通过颈外静脉给药4h后处死动物，收集肺泡灌洗液(BALF)，测定BALF表面张力、总磷脂含量(TPL)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)及总蛋白(TP)含量；取右肺下叶，
4、行HE染色光镜观察.结果：与对照组相比，LPS可提高BALF中LDH活性［（8.4±1.9）vs(4.8±1.9)μkat/L,P0.05］和增加TP含量［(100±32）vs(28±17)g/L,P0.05］，使BALF中MDA含量升高；光镜下可见，LPS组呈典型间质性肺水肿表现；LPS可降低BALF中TPL含量［(342±59)vs(432±45)μg/kg,P0.05］、增加表面张力［(23.3±2.9)vs(19.8±2.6)mN/m,P0.05］，LPS组AKP活性较对照组显著升高［(360±100)vs(100±80)nkat/L,P0.05］.结论：LPS可以引起ATⅡ的损伤.f
5、reela公司）；碱性磷酸酶(AKP)，乳酸脱氢酶(LDH)，丙二醛(MDA)试剂盒（南京建成生物工程研究所）；磷标准溶液由第四军医大学预防系营养与食品卫生学教研室高双斌高级实验师惠赠；725C型紫外可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）.1.2方法1.2.1动物分组将动物随机分为2组：①对照组(n=8)，经颈外静脉导管注入与LPS组等容积生理盐水;②模型组(n=8)，经颈外静脉导管注射2mg/kgLPS，以复制ALI动物模型.1.2.2手术及标本采集将大鼠腹腔注射200g/L乌拉坦5mL/kg,麻醉后固定于鼠板;沿颈部正中切开皮肤,分离一侧颈外静脉,插入导管给药，给药后4h行颈椎脱臼处死并行气
6、管插管术，以20mL/kg生理盐水进行支气管肺泡灌洗，连续3次，取第1次灌洗所得肺泡灌洗液(BALF)0.2mL用于表面张力的测量，收集所有BALF并记录BALF回收量，1000r/min离心10min，取上清，取其中1.4mL用于测AKP,MDA,LDH,总蛋白(TP)等，剩余上清用于磷脂的提取.1.2.3肺组织的光镜观察取右肺下叶,以40mL/L甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色，光学显微镜观察.1.2.4BALF中AKP,MDA,LDH,TP的测量根据试剂盒说明书测量BALF中AKP,MDA,LDH的含量.考马斯亮蓝G250染色法测定TP含量.1.2.5总磷脂(TPL)的测定采用Bartl
7、ett法［4］略有改进.BALF中加入2倍体积的氯仿-甲醇（2∶1,V/V）萃取液，震荡1min,2500r/min离心10min，弃上层液体但不弃界面杂质.加入1/4体积的甲醇-水（1∶1,V/V）萃取液，震荡1min,2500r/min离心10min.弃去上层液及界面杂质，氮气吹干，即得到TPL,-20℃保存待测.将TPL加入1mL高氯酸加热，温度由低到高逐渐上升，直至颜色由黑变白表示磷脂完全
