分析脂多糖对肺泡ⅱ型上皮细胞的损伤功能

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时间:2018-10-23

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1、分析脂多糖对肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤功能【脂多糖类;肺表面活性剂;急性病,肺/损伤【Abstract AIM:Tostudytheinjuringeffectoflipopolysaccharide(LPS)onalveolartypeⅡcells(ATⅡ)inacutelunginjury(ALI).METHODS:Sixteenratsizedinto2groups:controlgroupandLPSgroup.Controlgroupaleicdialdehyde(MDA)contentsintheBALFeas

2、ured;theactivitiesoflactatedehydrogenase(LDH)andalkalinephosphatase(AKP)inBALFicroscope.RESULTS:paredonaryedemainLPSgroupbythemicroscopy;TPLcouldbedecreased[(432±45)vs(342±59)μg/kg]andsu***cetensionbeincreased[(19.8±2.6)vs(23.3±2.9)mN/m]byLPS(P%26lt;0.05);LPScou

3、ldincreasesignificantlytheactivityofAKP[(100±80)vs(360±100)nkat/L](P%26lt;0.05).CONCLUSION:LPScaninjuretheATⅡandsuppressthesecretionofpulmonarysu***ctantsinacutelunginjury.【Keyonarysu***ctants;acutelung/injuries【 目的:探究急性肺损伤时脂多糖(LPS)对肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)的损伤功能.方法:将16只SD大

4、鼠随机等分为生理盐水对照组、LPS模型组.通过颈外静脉给药4h后正法动物,收集肺泡灌洗液(BALF),测定BALF表面张力、总磷脂含量(TPL)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)及总蛋白(TP)含量;取右肺下叶,行HE染色光镜观察.结果:和对照组相比,LPS可进步BALF中LDH活性[(8.4±1.9)vs(4.8±1.9)μkat/L,P%26lt;0.05]和增加TP含量[(100±32)vs(28±17)g/L,P%26lt;0.05],使BALF中MDA含量升高;光镜下可见,LPS组

5、呈典型间质性肺水肿表现;LPS可降低BALF中TPL含量[(342±59)vs(432±45)μg/kg,P%26lt;0.05]、增加表面张力[(23.3±2.9)vs(19.8±2.6)mN/m,P%26lt;0.05],LPS组AKP活性较对照组明显升高[(360±100)vs(100±80)nkat/L,P%26lt;0.05].结论:LPS可以引起ATⅡ的损伤,并抑制其合成、分泌肺表面活性物质.【脂多糖类;肺表面活性剂;急性病,肺/损伤急性肺损伤(ALI)由各种肺内外致病因素所致.发病机制复杂、治疗手段有限,

6、尤其是在急性呼吸窘迫综合征阶段,死亡率高达50%以上.肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)不仅可合成、分泌肺表面活性物质(PS),还具有修复肺泡上皮、肺水转运、局部免疫等多种重要生理功能[1-3],该细胞损伤是ALI发病过程中的重要环节之一.脂多糖(LPS)是内毒素的主要生物活性成分,具有极强的生物活性,且肺是内毒素的主要靶器官之一.现已明确革兰阴性菌感染、内毒素血症是ALI主要致病原因之一.但是LPS是否对ATⅡ有损伤功能还存在较大争议,我们拟通过动物实验证实LPS对ATⅡ的损伤功能,进一步揭示ALI的发病机制.1材料和方法1

7、.1材料成年SD大鼠16只,体质量200~250g,雌雄各半(第四军医大学实验动物中心);LPS(美国Sigma公司);碱性磷酸酶(AKP),乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程探究所);磷标准溶液由第四军医大学预防系营养和食品卫生学教研室高双斌高级实验师惠赠;725C型紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂).1.2方法1.2.1动物分组将动物随机分为2组:①对照组(n=8),经颈外静脉导管注进和LPS组等容积生理盐水;②模型组(n=8),经颈外静脉导管注射2mg/kgLPS,以复制ALI动

8、物模型.1.2.2手术及标本采集将大鼠腹腔注射200g/L乌拉坦5mL/kg,麻醉后固定于鼠板;沿颈部正中切开皮肤,分离一侧颈外静脉,插进导管给药,给药后4h行颈椎脱臼正法并行气管插管术,以20mL/kg生理盐水进行支气管肺泡灌洗,连续3次,取第1次灌洗所得肺泡灌洗液(BALF)0.2mL用于表面张力的丈量,收集所有BALF并记录

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