脐带间质干细胞移植对G raves病小鼠调节性B细胞的影响.pdf

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1、1l68重庆医学2015年3月第44卷第9期论著·基础研究doi：10．3969／j．issn．16718348．2015．09．005脐带间质干细胞移植对Graves病小鼠调节性B细胞的影响李荣良，韩扣兰，戴小丽，黄诚，李卫勇(盐城卫生职业技术学院临床医学院，江苏盐城224005)[摘要]目的探讨脐带间质干细胞(uc—MSCs)治疗Graves病(GD)小鼠的作用机制。方法32只小鼠随机分为正常对照组(GO组)、GD对照组(Gl组)和UC—MSCs治疗组(G2组)。留取小鼠血清，化学发光法检测血清游离甲状腺素(FT4)水平，酶联免

2、疫吸附法检测甲状腺刺激抗体(TSAb)浓度。取甲状腺，制备石蜡切片行苏木精一伊红染色。取脾脏，部分制成单个核细胞悬液，行三标记免疫荧光染色、流式细胞分析CDldCD5CD19Bregs比例；部分脾脏提取总RNA，实时荧光定量PCR检测Bregs相关细胞因子白细胞介素一10(II一10)mRNA和转化生长因子一口(TGF—p)mRNA的表达水平。；结果26周时G2组血清中TSAb浓度与脾脏组织中CD19B细胞较G1组明显降低(P<0．05)，B细胞中CDldCD5CD19Bregs所占比例和脾组织II10mR—NA、TGF8mRNA表

3、达量较Gl组却明显上升(P<0．05)，且在移植前、后血清TSAb浓度差与脾脏中CDldCD5CD19。。gregs所占比例变化呈显著负相关，与IL一10、TGF—pmRNA的表达量变化呈显著正相关。结论UC—MSCs可能通过上调Bregs表达而发挥治疗作用。[关键词]脐带；间质干细胞；Graves小鼠；调节性B细胞[中图分类号]R392．12[文献标识码]A[文章编号]16718348(2015)09一l168一O3Theeffectofumbilicalcordmesenchymalstemcellstransplantatio

4、nfortheGDmiceonregulatoryBcellsLiRongliang，HanKoulan，DaiXiaoli，HuangCheng，LiWeiyong(1)eparllnentn，Dentistry，YanchengInstituteofHealthScience，Yam’heng，Jiangsu224005，China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatethetherapeuticmechanismofumbilicalcordmesenchymalstemcell(UC—MSCs)t

5、rans—plantationforthegravesdisease(GD)mice．MethodsThirtytwomiceweredividedinto3groupsasfollowing：normalcontrolgroup((；O)。GI)controlgroup(G1)，UC—MSCsgroup(G2)．Enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)wasusedtomeasurethelevelofI"SAbinlAoodserumandtheexpressionofFT4wasmeasure

6、dbychemiluminescence．Thyroidsectionswerestainedwithhema—toxylinandeosin(HE)forhistologicalexamination．SplenocyteswerestainedwithmulticolorimmunofluorescenceanddetectedbyflowcytomelrytoanalyzethepercentagesofCDldCD5CD19regulatoryBcells(Bregs)．ExpressionsofIL一10andTGF-ig

7、mR—NAiuspleenorganizationweremeasuredbyReal—timePCR．ResultsAt26weeks，theleve1ofTSAbinbloodseruminG2wasmoresignificantlydecreasedthaninG1(P<0．05)，andthelevelofCD19BinspleeninG2wasalsomoresignificantlydecreasedthanin(1(P<0．05)，however，thepercentageofCD1dCD5CD19Bregssplen

8、ocytesandthelevelsofIL一10andTGF-I~mRNAinspleenorganizationweremoresignificantlyincreasedthaninG1(P％0．05)．Theconcentra