雷公藤甲素对阿霉素肾病大鼠肾脏乙酰肝素酶表达及蛋白尿的影响.pdf

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1、长江大学学报(自科版)2014年12月号医学下旬刊第11卷第36期JournalofYangtzeUniversity(NatSciEdit)Dec．2014，Vo1．11No．36雷公藤甲素对阿霉素肾病大鼠肾脏乙酰肝素酶表达及蛋白尿的影响曹英杰，陈晓岚范亚平，杨红利(南通大学附属医院肾脏内科，江苏南通。。。’)[摘要]目的：探讨阿霉素肾病大鼠蛋白尿形成中乙酰肝素酶(heparanase，Hpa)的作用及雷公藤甲素对其的影响。方法：健康清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、阿霉素肾病模型组(B组)及雷公藤甲素治疗组(c组)，于0、7、14、21、28d分别观察其24h尿蛋白

2、定量，并于0、14、2l、28d免疫组化检测肾小球内Hpa、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparansulfateproteoglycans，HSPG)的表达变化，WesternBlot检测各组各时间点Hpa及HSPG蛋白表达的变化。结果：雷公藤甲素可减少阿霉素肾病大鼠蛋白尿，降低Hpa的表达(P<0．05)，上调HSPG的表达(P<0．05)。蛋白尿与Hpa的表达呈正相关(r一0．729，P

3、病；蛋白尿；乙酰肝素酶；雷公藤甲素；硫酸乙酰肝素蛋白多糖[中图分类号]R692；R392．1[文献标志码]A[文章编号]1673—1409(2014)36一O¨0一O6HSPG是肾小球基底膜的重要组成成分，构成肾小球滤过的电荷屏障，其结构的破坏系导致蛋白尿的重要原因。Hpa是一种葡萄糖醛酸内切酶，能识别HSPG的侧链I1]。将侧链水解为多个小分子片段，导致肾小球基底膜电荷屏障的破坏。近年来研究表明其表达异常与蛋白尿的发生发展有密切关系[3]。雷公藤的主要有效成分雷公藤甲素(triptolide)，具有多种药理作用，包括免疫抑制、抑制炎性反应、抗肿瘤、抗生育等。在各种肾小球疾病中

4、，其可以通过多种有效机制保护及修复肾小球足细胞l_5]。本实验中我们观察阿霉素肾病大鼠模型肾小球中Hpa和HSPG的表达，及雷公藤甲素治疗后表达的改变，探讨Hpa在此模型中的病理作用及其可能的致病机制，及雷公藤甲素对其的保护作用，为临床治疗肾脏病提供理论基础和作用靶点。1材料与方法1．1材料与试剂健康清洁级雄性SD大鼠，每只体重200~230g，取自南通大学实验动物中心。兔抗鼠Hpa抗体购于GroundworkBiotechnologyDiagnosticate公司，羊抗鼠HSPG抗体购于lifespan公司，生物素化羊抗兔和兔抗羊二抗购于北京中杉金桥生物技术有限公司。注射用阿

5、霉素购于浙江海正药业股份有限公司(生产批号091002)，雷公藤甲素购自南京泽朗医药科技有限公司。1．2动物分组及处理适应性喂养SD大鼠1周后按随机分组法分为3组，①A组(对照组)；②B组(阿霉素模型组)：大鼠尾静脉一次性注射阿霉素5mg／kg；③C组(雷公藤甲素治疗组)：大鼠尾静脉一次性注射阿霉素5mg／kg后，次日起给予雷公藤甲素(0．2mg／kg／d)灌胃，连续治疗4周。其中A组及B组均在次13给予同疗程等量生理盐水灌胃。[收稿日期]2014—09—17[基金项目]江苏省六大人才高峰资助课题(2010一WS一036)。[作者简介]曹英杰(1981一)，女，讲师，硕士，主要

6、从事肾脏疾病临床及科研工作；通讯作者：陈晓岚．Email：chenxI8448@sina．com0·112·医学下旬刊*实验研究2014年12月注：同一时间点与A组比，aPO．05)。B组第7天24h尿蛋白定量有所增加，但与A、C组比较差异无统计学意义(P>0．05)；第14、21及28天时，B组24h尿蛋白定量较同时间点A组及同组前一时间点明显升高，差异有统计学意义(P

7、间点明显升高，差异有统计学意义(P<0．05)；而与B组比明显下降，差异有统计学意义(Pd0．05)。2．3肾组织中Hpa及HSPG的表达A组各时问点Hpa的表达无明显差异(P>0．05)。第14、21及28天时，B组、c组Hpa的表达较同时间点A组及同组前一时间点明显升高，差异有统计学意义(P％0．05)(见表2，图2，图4)。而HSPG的表达则明显降低，差异有统计学意义(P<0．05)。C组中第14、21及28天时Hpa的表达O较同时间点B组明显降低，差异有统计学意义(P<0．05)；而