地中海贫血患儿群体反应性抗体对脐血CD34＋细胞集落形成的影响.pdf

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1、中外医学研究2011年12月第9卷第36期CHINESEANDFOREIGNMEDICALRESEARCH≯雾曩磐舞露搿营≯≯∥碧霉≯!≯∥鹫誊j碧警季缪蟊静澎≯蒡§磐∥黟磨_∥辩l地中海贫血患儿群体反应性抗体对脐血CD34+细胞集落形成的影响杨兴鸽马国瑞鲁学良河南科技大学第一附属医院(河南洛阳471003)河南科技大学第三附属医院【摘要】目的探讨特异性群体反应性抗体(PanelReactiveAntibody，PRA)对脐血CD34+细胞集落形成的影响。方法取含PRA的p地贫患儿血清，与脐血CD34+细胞、补体联合孵育，行半固体集落培养。观察共对CD34

2、+细胞集落形成影响。结果经PRA阳性血清孵育的脐血CD34+细胞经半固体集落培养所形成的集落数下降。结论地中海贫血血清PRA对脐血CD34+细胞的集落形成能力有抑制作用，补体可增强上述作用。【关键词】脐血；CD34+造血干细胞；地中海贫血；群体反应性抗体TheefectofthalassemiaPRAonthecolonyformationofCD34+cellsfromcordbloodYANGXing—ge，MAGuo—rui，LUXue—f—ang．FirstAfiliatedHospitalofttenanUniversityofSciencean

3、dTechnology，Luoyang471003，China．【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofthalassemiaPRAonthecolonyformationofCD34+cellsfromcordblood．Meth~sThePRAserafrompatientswithB—thalassemia，CD34+celsofumbihealcordbloodwereincubatedwithdifferentseraandcomplementre—spectively．ResultsAfterthePRAs

4、erumincubationthecountsofthecolonyformationofCD34+cellsfromcordbloodweredecreased．Con-dusionThatthalassemiaserumPRAcouldinhibitthecolonyformationofCD34+cellsfromcordblood，whichcouldalsobestrengthenedbythepresenceofthecomplementatthegivenconcentrationinwriter'sstudy．【Keywords】Cordb

5、lood；CD34+cells；Thalassemia；Panelreactiveantibody脐血造血干细胞移植治疗地中海贫血的疗效越来越被人们殖分化的影响。所关注。一直以来造血干细胞移植治疗B地贫的低植入率问题1材料与方法严重制约着造血干细胞移植在B地贫治疗中的应用。Gaziev1．1标本及材料脐血(cB)：共收集7份健康足月妊娠分娩之等报道骨髓移植(BMT)治疗122例地贫患者，地贫的植入率明胎儿脐静脉血。实验血清：采用莱姆德混合抗原板(LATM)和莱显低于白血病；1998年欧洲脐血移植(UCBT)协作组总结了12姆德抗原板(LAT)检测PRA，检

6、测方法和PRA分级标准见参考例RD—UCBT的地贫患者，成功率约为60％，影响UCBT效果的文献[6]。收集7份PRA阳性血清和7份PRA阴性血清，备用。危险因素包括：体重、年龄，体重大于20kg、年龄大于6岁，移植人CD34+细胞分离试剂盒购自德国MihenyiBiotee公司；兔补效果较差，推测可能与UCBT时单份脐血干细胞数量不足及患儿体、LATM、LAT板试剂盒购自美国OneLambda公司。既往多次输血引起铁负荷过高及移植前免疫反应异常等有关；I．2脐血的HLA分型及CD34细胞分离从采集到的脐血标FrancoLocateUi等3亦推测移植前多次

7、输血导致受者对异基因本中取出2ml送HLA抗原分型检测，具体步骤参考文献[7]。抗原致敏，可能是地贫移植低植入率的原因之一。人类白细胞抗由专人检测并报结果。采用密度梯度离心法分离单个核细胞。原(HLA)是介导器官移植排斥反应的主要分子，患者在多次输采用免疫磁珠分选法经免疫磁珠自动分选器(auto—MACS)分选血、妊娠或移植后受到同种HLA免疫致敏而产生的群体反应性CD34+细胞。抗体(panelreactiveantibody，PRA)，是造成超急性排斥反应和移1．3实验分组实验分A—E组，孵育方案见表1，各组终体积植物丢失的主要原因．5J。翁文俊等对1

8、5例重型B地贫患儿为2ml。实验血清均于56℃水浴箱30min灭活