人参皂甙rg1和rb1对脐血cd34+细胞凋亡的影响

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1、人参皂甙Rg1和Rb1对脐血CD34+细胞凋亡的影响:郭若霖万晓华陈晓建谈志龙王学谦【关键词】人参皂甙【摘要】目的探讨人参皂甙Rg1和Rb1对体外培养体系中撤除细胞因子引起的脐血CD34+细胞凋亡的干预作用。方法免疫磁珠法纯化获得脐血CD34+细胞,在含有TPO(50μg/L)、SCF(50μg/L)的StemSpanTMSFEM无血清液体培养基中培养7天后,撤除细胞因子实验组加入不同浓度Rg1、Rb1,24h和72h后收集细胞,流式细胞仪FITC-Annexin-V/PI双色荧光标记检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3活性。结果撤除细胞因子24h后,撤因子组细胞凋亡率为(2

2、4.79±2.80)%,Rgl(2.5mg/L、5mg/L、10mg/L)各组细胞凋亡率均降低,分别为(12.35±2.07)%、(11.87±1.20)%和(13.91±0.50)%(P<0.01);Rb1各组(5mg/L、10mg/L)的细胞凋亡率分别为(17.88±0.65)%、(20.61±0.85)%(P<0.01);撤除细胞因子24h和72h对照组,Caspase-3活性设为1.00,Rg1-2.5组(0.72±0.09,0.57±0.22,P<0.01),Rg1-5组(0.51±0.11,0.42±0.10,P<0.01),Rg1-10组(0.6

3、3±0.06,P<0.01;0.83±0.12,P>0.05),Rb1-5组(0.54±0.18,0.32±0.18,P<0.01)Rb1-10组(0.87±0.07,P>0.05;0.55±0.03,P<0.01),Caspase-3活性均低于对照组。结论人参皂甙Rg1、Rb1能拮抗因撤除细胞因子诱导脐血CD34+细胞凋亡,此作用与Caspase-3信号通路有关。关键词细胞凋亡脐血CD34+细胞Caspase-3人参皂甙.【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofginsenosidesRg1andRb1d

4、uringumbilicalcordalbloodhematopoieticcellsapoptosisinducedbygroanumbilicalcordalbloodCD34+stemcellsSpanTMSFEMserum-freemediumcontainingcytokinesTPO(50μg/L)andSCF(50μg/L)for7days.Thencellsaintainedinthesamemediumentalgroupsexin-V/PIfloetˉricassayinecellapoptosisrateandtheactivityofCaspase-3.Res

5、ults24hoursafˉterthecytokinesg/L,5mg/L,10mg/L)groupsg/L,10mg/L)onstratedthatapoptosisinducedbygrobilicalcordalbloodhematopoieticcellscanbeinhibitedbyRg1andRb1andthiseffectbilicalcordalbloodCD34+cellscaspase-3ginsenosides细胞凋亡是细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序的一种主动性的死亡过程,它涉及细胞内一系列的信号转导和调控过程。在造血过程中,细胞凋亡在调控细胞

6、增殖、分化的平衡中起重要作用。人参“补气养血”的功效虽然已经在临床上应用已久,但机理并未阐明。近年来对人参的主要成分人参皂甙的研究很多,多集中在促进ˇ基金项目:天津市科委自然科学基金资助项目(编号:013608511)造血祖细胞增殖,诱导髓性白血病细胞凋亡,增强机体免疫功能等方面。国内学者研究发现人参皂甙不但能促进造血干/祖细胞增殖,并且能诱导定向分化[1]。但人参皂甙Rg1和Rb1对造血干细胞凋亡的影响尚未见报道。本研究观察了人参皂甙Rg1和Rb1对撤除细胞因子引起的脐血造血细胞凋亡的拮抗作用,以期在细胞水平上为人参皂甙“补气养血”功效的作用机制提供更多的实验室证据。1材料与方法1

7、.1标本脐血采自天津医科大学第二附属医院和天津市中心妇产科医院,无菌条件下采集正常足月分娩的胎儿脐带血,母亲和新生儿均应健康,肝素抗凝。采集后4h内用相对密度为1.077的Ficoll淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞(MNC),洗涤,计数备用。1.2CD34+细胞的分离及纯度分析利用德国MiltenyiBiotec公司CD34+细胞单克隆抗体免疫磁珠分离系统(MACS)分离富集CD34+细胞备用。分离方法依试剂盒说明书进行。流式细胞仪检测CD34+细胞纯度

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