人参皂甙Rg1和Rb1对脐血CD34+细胞凋亡的影响.doc

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1、人参皂甙Rg1和Rb1对脐血CD34+细胞凋亡的影响作者:郭若霖万晓华陈晓建谈志龙王学谦【关键词】人参皂甙【摘要】目的探讨人参皂甙Rg1和Rb1对体外培养体系中撤除细胞因子引起的脐血CD34+细胞凋亡的干预作用。方法免疫磁珠法纯化获得脐血CD34+细胞,在含有TPO(50μg/L)、SCF(50μg/L)的StemSpanTMSFEM无血清液体培养基中培养7天后,撤除细胞因子实验组加入不同浓度Rg1、Rb1,24h和72h后收集细胞,流式细胞仪FITC-Annexin-V/PI双色荧光标记检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3活性。结果撤除细胞因子24h后,撤因子组细

2、胞凋亡率为(24.79±2.80)%,Rgl(2.5mg/L、5mg/L、10mg/L)各组细胞凋亡率均降低,分别为(12.35±2.07)%、(11.87±1.20)%和(13.91±0.50)%(P<0.01);Rb1各组(5mg/L、10mg/L)的细胞凋亡率分别为(17.88±0.65)%、(20.61±0.85)%(P<0.01);撤除细胞因子24h和72h对照组,Caspase-3活性设为1.00,Rg1-2.5组(0.72±0.09,0.57±0.22,P<0.01),Rg1-5组(0.51±0.11,0.42±0.10,P<0.01)

3、,Rg1-10组(0.63±0.06,P<0.01;0.83±0.12,P>0.05),Rb1-5组(0.54±0.18,0.32±0.18,P<0.01)Rb1-10组(0.87±0.07,P>0.05;0.55±0.03,P<0.01),Caspase-3活性均低于对照组。结论人参皂甙Rg1、Rb1能拮抗因撤除细胞因子诱导脐血CD34+细胞凋亡,此作用与Caspase-3信号通路有关。关键词细胞凋亡脐血CD34+细胞Caspase-3人参皂甙.【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofginse

4、nosidesRg1andRb1duringumbilicalcordalbloodhematopoieticcellsapoptosisinducedbygrowthfactorswithdrawal.MethodsHumanumbilicalcordalbloodCD34+stemcellswerepurifiedandobtainedsteriley.CD34+cellswereculturedinStemSpanTMSFEMserum-freemediumcontainingcytokinesTPO(50μg/L)andSCF(50μg/L)for7days.The

5、ncellswerecollectedandmaintainedinthesamemediumwiththegrowthfactorsdeprivationfor24hand72h.TheexperimentalgroupswererespectivelytreatedwithRg1orRb1withdifferentconcentrations.FITC-Annmexin-V/PIflowcyloanalyzerandCaspase-3colorimetˉricassaywererespectivelyusedtodeterminecellapoptosisrateand

6、theactivityofCaspase-3.Results24hoursafˉterthecytokineswithdrawal,theapoptosisrateincontrolcellswas(24.79±2.80)%;theapoptosisrateinRg1(2.5mg/L,5mg/L,10mg/L)groupswere(12.35±2.07)%,(11.87±1.20)%and(13.91±0.50)%(P<0.01);inRb1groups(5mg/L,10mg/L)were(17.88±0.65)%,(20.61±0.85%)(P<0.01)re

7、spectively.24hoursand72hoursaftercytokinesdeprivation,Caspase-3activitiesincontrolgroupsweretakenas1.00,thevaluesinRg1-2.5groupwere0.72±0.09and0.57±0.22(P<0.01),inRg1-5groupwere0.51±0.11and0.42±0.10(P<0.01),inRg1-10groupwere0.63±0.06(P<0.01)and0.83±0.

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