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《表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因重组腺病毒的构建.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第33卷第3期中国预防兽医学报VO1.33.NO.32011年3月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineMar.20l1doi:10.3969~.issn.1008—0589.2011.03.02表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因重组腺病毒的构建耿合员,孙元,韩宗玺,邵昱昊,仇华吉,孔宪刚,刘胜旺(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨15OOO1)摘要:为构建表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)主要免疫原s1蛋白的重组腺病毒,本研
2、究以复制缺陷型人5型腺病毒为载体,以IBVCl</cH/LHLJ/04V株s1基因为外源插入靶基因,通过细菌内同源重组法构建了一株稳定表达IBVSl蛋白(90ku)的重组腺病毒,命名为rAdV.S1。通过PCR鉴定、间接免疫荧光及westernblot检测证实s1蛋白在重组腺病毒中获得表达。对构建的重组腺病毒和亲本腺病毒的生长动力学分析表明,该重组病毒的毒价为10TCID(/mL,并且两者在生长动力学方面无显著差异。本研究为动物试验和该重组腺病毒免疫特性的研究奠定基础。关键词:禽传染性支气管炎病毒;S1基因;重组腺病毒中图分
3、类号:$852.65文献标识码:A文章编号:1008—0589(2011)o3—0173.04ConstructionofrecombinantadenovirusexpressingS1subunitofspikeproteinofinfectiousbronchitisvirusGENGHe—yuan,SUNYuan,HANZong—xi,SHAOYu—hao,QIUHua-ji,KONGXian—gang,LIUSheng—wang(DivisionofAvianInfectiousDiseases,StateKeyL
4、aboratoryofVeterinaryBiotechnology,HarbinVeterinaryResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Harbin150001,China)Abstract:TheS1subunitofspikeprotein(90ku)ofinfectiousbronchitisvirus(IBV1iSthemainimmunodominantproteinwhichcaninducevirusneutralizationandh
5、aemagglutination—inhibitionantibodiesInthisstudy.arecombinantreplication.defeetivehuman5adenovirus(rAdV—S1thatexpressesS1genefromIBVstrainCK/CH/LHLJ/04Vwasconstructedwithviraltiterofl0TCIDdmLinHEK293.WesternblotandindirectimmunofluorescenceassayindicatedthattheS1ge
6、newasexpressedinHEK293cellsinfectedwithrAdV—S1.ThegrowthdynamicsindicatedthattherewerenostatisticallydiferencesbetweentherAdV—S1andparentaladenovirus.TherAdV—S1couldbesuedtofurtherstudyfortheimmunogenicityinchickens.KeyWOrds:infectiousbronchitisvirus;S1gene;recombi
7、nantadenovirus鸡传染性支气管炎(Avianinfectiousbronchitis,白,即表面纤突(s)蛋白、膜(M)蛋白、小膜(E)蛋白IB)是由IB病毒(IBV)引起的鸡的一种急性、高度接和核衣壳(N)蛋白。其中,S蛋白由亚基因组触性呼吸道传染病。IBV能够在消化道上皮、输卵mRNA2编码,在宿主细胞内首先以前体的形式合管、肾脏中复制,引起产蛋鸡产蛋量和蛋品质下成,随后在蛋白酶的作用下被裂解为两个亚单位:降,是危害养禽业的主要病原之一⋯。s1和$2t。S蛋白的裂解为病毒感染所必需,并且IBV为线性、单股正链
8、、不分节段的RNA病每个亚单位具有不同的功能,s1蛋白参与病毒与细毒,基因组大小为26.7kb,编码4种主要结构蛋胞受体的结合,而s2蛋白将S1蛋白锚定在病毒囊半Correspondingauthor收稿日期:2010-10—03基金项目:匡I家十一五科技支撑计划重大资助项目(2006BA
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