EGCG对小鼠H22肿瘤生长及VEGF、PCNA表达的影响-论文.pdf

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1、第19卷第1期烟台职业学院学报·V．01．19No．12015年5月JournalofYamaiVocationalCollegeMar．2013EGCG对小鼠H22肿瘤生长及VEGF，PCNA表达的影响枣孙藜玮L2，梁患2，孙若思2，王琳琳2(1．青岛大学医学院营养研究所，山东青岛266021；2．烟台职业学院，山东烟台264670)摘要：观察接种H。。细胞小鼠的肿瘤生长以及增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达是否受表没食子儿茶素没食子酸酯(一)一(Epigallocatechingallate，EG

2、CG)的影响．结果显示，EGcG各剂量组抑瘤率分别为24．238％(54．002％、40．023％，肿瘤增长均此模型组缓慢，差异有显著性(P<0．05)。EGGG各剂量匆]．VEGFFB性表达均低I于模型组(P<0．05)；EGCG中、高剂量组PCNA阳性表达较模型组显著减少(P<0．05)。EGCG=-T以抑制小鼠H22肿瘤的生长、影响VEGF和PCNA的表达。关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯；血管内皮细胞生长因子；增殖细胞核抗原；肝肿瘤中图分类号：R735．7文献标识码：B文章编号：1673-5382(2013)01．0089．

3、04前言1．1材料绿茶的主要成分是绿茶多酚，主要包括四种单1．1．1EGCG(杭州禾田生物技术有限公司提供)体成分。它们具有消除自由基、抗氧化及延缓衰老等1．1．2动物以及瘤株。雄性昆明种小鼠，75只，由青岛多种生理功能。这几年的研究显示，绿茶或茶多酚市动物实验中心提供，平均重18-239。小鼠H22肝癌的抗癌或防癌作用非常明显Ⅲ。而绿茶的抗癌功效主细胞株，山东医学科学院药物研究所药理室从中国医要归功于茶叶中含量最多的活性成分表没食子儿茶学科学院药物研究所引进并保种的菌株复苏5、6、7素没食子酸酯(一)一(Epigallocatec

4、hingallate，代后，用于实验。EGCG)，本实验通过给小鼠灌WEGCG，然后观察其1．1．3试剂。VEGF兔抗小鼠抗体以及PCNA兔抗小对H22月中瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)圾血管鼠抗体(青岛宏达通生物技术有限公司)；新生牛血内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响来确定表儿清(购[刍Gibco)lDAB显色kit、SP染色kitq匕京中茶素主要成分是否参与了绿茶多酚类提取物的抗肿山生物技术有限公司)；注射用5一氟尿嘧啶(5-Fu，瘤作用，并对其作用机制进行初步探讨。0．259／lOmL／支，上海旭东海普药业有限公司)

5、。1．1．4仪器。ZMN-7803型自动组织包埋机嫦州华利电子有限公司)，生物图像分析系统(江苏捷达科技公1材料与方法收稿日期：2015—02—10基金顶目：青岛市科技局资助，青岛市公共领域科技支撑计i,p页目(to一5—5一I一6一nsh)．作者简介：孙藜玮(1981-)，女，山东招远人，烟台职业学院助教，青岛大学医学院营养研究所硕士研究生．．89．烟台职业学院学报第195司)，LEICARM2135切片机(德国)，SimplePCI图像成棕黄色而胞浆未被染色的细胞则为PCNA阳性细分析系统(v5f．2，CompixInc，美国)

6、，OLYMPUS—胞。VEGF、PCNA阳性表达越强则灰度值越小。BX50显微镜(日本)。1．3统计学分析1．2方法采用统计学软件SPSSl8．0处理数据，用单因素1．2．1动物模型的建立。75只昆明小鼠适应性喂养1周方差分析比较组间的5个指标，后续的两两比较均采后，按体重随机分为5组(n=15)。每只小鼠在右前肢用SNK—q检验。腋窝皮下接种0．2mLH22瘤细胞悬液，细胞浓度为2X107／mL。24h后，根据小鼠体重进行干预。EGCG低、2结果中、高剂量组(分别给予20、40、80mgkg-1d-1EGCG灌胃)，5-Fu组(给

7、予5-Fu腹腔注射)，模型组2．1小鼠的成瘤情况统计与状态观察(0．5ml生理盐水灌胃)。每一组给药2周，不能间断。EGCG组小鼠肿瘤生长缓慢，潜伏期(TT)为6天，1．2．2样品准备。各组小鼠最后一次给药24h以后，称并且精神状态较好，活动基本正常，皮毛也基本光得小鼠重量而后处死并对其进行解剖(解剖过程要保洁；5一Fu组小鼠状态比EGCG组好，具有良好的精神证无菌)，剥离出肿瘤并取脾脏和胸腺，用滤纸吸干状态，活动正常，并且肿瘤生长较EGCG组慢，TT为7后称其质量，计算脏器指数和抑瘤率。胸腺和脾脏质天；模型组小鼠肿瘤生长最快，TT

8、为5天，肿瘤扩散量与体质量之比作为胸腺指数和脾指数；抑瘤率=(对至下巴和颈部，小鼠活动明显减少且比其它组小鼠消照组平均瘤质量一给药组平均瘤质量)／对照组平均瘤瘦，出现呼吸困难、毛色脏乱，精神不振的状态。质量X100％。2．2各组小鼠肿