阴虚对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响论文

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1、阴虚对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响论文郑里翔张玉仁朱卫丰刘红宁【摘要】目的为阐明阴阳失衡对肿瘤生长的影响。方法采用甲状腺素和利血平、氢化可的松分别制作阴虚、阳虚模型,并接种S180瘤株；用RT-PCR的方法分析肿瘤细胞基因表达的水平。结果阴虚组的瘤重均高于正常和阳虚组,而差异不明显（P0.05），但影响肿瘤增殖的PA基因表达水平明显高于正常和阳虚组(P0.05)。结论阴虚体质可加速肿瘤的生长，其机理可能是增加肿瘤细胞中的PA基因的表达。【关键词】阴阳虚荷瘤小鼠瘤重基因表达Abstract：ObjectiveToelucidatetheinfluenceof"Yin"and

2、"Yang"imbalanceontumoroccurrence.MethodsThyroxineodelrespectively.Thenthemodelmiceorcells.Thelevelofgenesexpressionororethanthenormalgroup'sand"Yang"deficientgroup’s,butthedifferenceorproliferationalgroupand"Yang"deficientgroup(P0.05).Conclusion"Yin"deficientphysiquecanacceleratetumorg

3、roechanismmaybethatitincreasesthePAgeneexpressionintumorcells.Keyorbearingmicein"Yin"and"Yang"deficient;Tumorg／支)苏卫药准字(1982)第241701号，批号：20010302，扬州制药厂生产;甲状腺素，批号：0607501。利血平，SIMGA公司，批号：2000497。仪器：低温高速离心机，BECKMEN；PCR扩增仪GeneAmpPCRsystem9700(ABI)、凝胶成像系统Fluorchem9900(Alphainnotech)；试剂：TRIZO

4、L试剂盒购自上海生物工程技术公司;M-MLVReverseTranscriptionKIT购自上海晶美生物技术公司;MIX：上海晶美公司；其余的试剂均为分析纯1.2方法1.2.1动物模型的制备阴、阳虚模型参阅郑里翔［7］，造模后根据阳虚症状的客观指标：怕冷、畏寒喜暖、四肢不温或厥逆、小便清长、脉细、舌淡胖、倦缩拱背、精神萎顿、消瘦等确定模型成功与否;而阴虚组症状给药第1～2天无明显变化。第3～4天开始出现躁动不安、皮毛汗湿尤以夜间为甚，大便或干或湿，饮食量无明显改变，第5天肛门红,24h饮水量增加。第6～7天起出现日间神疲少动，体重减轻,清瘦,确定模型成功。1.2.

5、2肿瘤模型建立于超净工作台中，先取S180肉瘤瘤液0．1ml，以生理盐水20倍稀释，光学显微镜下计算1ml瘤液中活体瘤细胞数，以此计算瘤液的稀释倍数，用生理盐水稀释成2×106个／0．2ml。置于冰中保存，75％酒精消毒小鼠右腋皮肤，按每鼠0．2ml接种于小鼠右腋皮下,10日处死小鼠并称体重，严格按标准剥离干净皮下肿瘤组织，使用电子秤称量瘤重(精确到0．01g)，并迅速放到液氮中。1.2.3Trizol试剂提取总RNA提取冷冻组织(约0．1g)剪碎后加入液氮后碾成粉末，加1mlTrizol，彻底混匀。加0．3mI氯仿，用力摇匀后离心。取上清，加1mI异丙醇沉淀水相中

6、的RNA，得到的RNA经75％乙醇漂洗后溶解于DEPC水中。用紫外分光光度仪测总RNA的纯度及浓度(波长260／280nm)。RT—PCR的方法：首先逆转录cDNA，进行PCR扩增，PCR反应混合物总体积50ul。PCR引物、反应条件（见表1）。PCR反应产物在1％的琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下摄像，以β-actin为内参，用凝胶成像分析系统进行半定量分析。表1引物、产物大小及条件（略）1.3统计学方法各数据均以±s表示，，应用SPSS11.5统计分析软件处理实验数据,组间用t检验。2结果2.1接种瘤株的第10天,.freelsandhybridinsulin/IGF-

7、Ireceptorsinhumancancer［J］.CurrPharmDes.2007，13(7):671.［2］Broediatedbyreactiveoxygenspecies［J］.CancerRes.2007，15;67(8):3512.［3］陈玉龙苗艳艳肿瘤病机研究思路［J］.新中医，2007，39(4):91.［4］张玉芝浅谈中医药抗肿瘤的思路与体会［J］.时珍国医国药，2006，l7（8）：58.［5］鹤贾英杰浅谈《脾胃论》在中医治疗肿瘤中的应用［J］.内蒙古中医药，2007，35（1）：65.［6］袁兆庄平衡医学与阴阳调控［J］.中华现代皮肤科